实验所用黄粉虫(Tenebriomolitor)幼虫购于上海市徐汇区钦青花鸟市场。
四氢呋喃、无水乙醇购于国药集团药业股份有限公司；聚氯乙烯购于阿拉丁试剂(上海)有限公司；TaqDNA聚合酶购于天根生化(北京)科技有限公司。
傅里叶红外光谱仪，赛默飞世尔科技有限公司；PCR仪，上海赛默生物科技发展有限公司；凝胶成像系统，上海天能科技有限公司；凝胶渗透色谱，岛津公司；气相色谱-质谱联用仪，AgilentTechnologies公司。
LB培养基(g/L)：蛋白胨10.0，酵母膏5.0，NaCl10.0，琼脂20.0(固体)，pH7.0。
生理盐水：NaCl0.9g溶于100mL水中。
以上培养基均1×105Pa灭菌30min。
黄粉虫以PVC喂养32d后，在PVC组中随机挑选黄粉虫10条，采用1.4.3中方法取出肠道，将取出的完整肠道装入含有1mL无菌生理盐水的离心管中，经Votex振荡使肠道内容液全部析出，接入LB液体培养基中，将上述培养物在LB培养基上划线37℃培养，挑取单菌落进行纯化，筛选不同菌株，将筛选得到的菌株甘油冻存，以备下一步实验使用。
纯化后的菌落接入LB液体培养基中，37℃、200r/min培养过夜，将菌液于冷冻高速离心机4000×g离心10min使菌体沉淀。用无菌生理盐水重悬后再次离心，洗去LB培养基。将菌体重悬后，用紫外分光光度计将OD600调至1.0。再取1mL重悬好的菌液接种于无机盐液体培养基中，以PVC塑料片为唯一碳源进行培养，用紫外分光光度计检测菌的生长情况，以此来判断对PVC的降解作用。
对具有降解能力的细菌进行分子生物学鉴定。通过DNA提取试剂盒提取肠道菌株基因组，16SrRNA基因的扩增采用细菌通用引物27F(5′-CAGAGTTTGATCCTGGCT-3′)和1492R(5′-AGGAGGTGATCCAGCCGCA-3′)。PCR反应体系(25μL)：TaqDNAMasterMix12.5μL，上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL，DNA模板0.5μL，ddH2O11μL。PCR反应条件：94℃5min；94℃30s，50℃30s，72℃45s，35个循环；72℃5min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳测其纯度，然后送美吉生物测序公司进行测序。
将测序得到的序列通过NCBI网站进行同源序列搜索(BLAST)，匹配出同源序列。选取代表性菌株序列作进一步的分析，利用MEGA6.0软件进行系统发育分析。
在以PVC为唯一碳源的无机盐培养基中，将筛选得到的具有最佳降解效果的菌株于37℃、100r/min培养32d，对照组中则不加菌液。对经菌株降解后的PVC塑料片，用2.0%十二烷基磺酸钠(sodiumdodecylsulfate，SDS)水溶液搅拌洗涤1h，洗除PVC塑料片表面的菌落，清水洗净后，干燥，氯仿加热溶解，用凝胶渗透色谱测定其分子量。对照组也用相同方式处理。
培养结束后，收集1.4.7中的液体培养基，经10000r/min离心20min后，取上清液用0.22μm滤膜过滤后用GC-MS测定其降解产物。
在以PVC为唯一碳源的无机盐培养基中，将筛选得到的具有最佳降解效果的菌株于37℃、100r/min培养32d，对照组中则不加菌液。对经菌株降解后的PVC塑料片，用2.0%SDS水溶液搅拌洗涤1h，洗除PVC塑料薄膜表面的菌落，无菌纯化水洗净后，干燥。用SEM观察塑料薄膜表面形态。
从饲喂过程观察可以发现黄粉虫能主动啮食PVC塑料，并在食用后能正常生长，且平均存活1个月以上，随着黄粉虫取食PVC塑料质量的增加，黄粉虫的平均体重和发育程度均有明显增加。
从分离菌株对PVC的利用情况可以发现，6株菌中PVC-4和PVC-6对PVC有明显的利用能力，说明该两株菌具有降解PVC的酶系，能够将PVC分解并提供生长需要，也可以证明肠道中分离到的菌株是可以利用黄粉虫啮食PVC后在肠道降解消化，提供虫体生长所需要营养的重要微生物，也揭示了黄粉虫啮食PVC能够生长的生物学原理。
经GPC测定，PVC在经过菌株降解后Mw值为115391，对比降解前的Mw值127114，其Mw值相对降低了9.22%；经降解后Mn值由71022降为64764，其Mn值相对降低了8.81%。
PVC分子量的降低说明菌株能有效利用PVC为唯一碳源，同时也说明菌株对PVC塑料存在一定的降解效果。
本研究只对黄粉虫肠道微生物的好氧菌进行了研究，肠道微生物中厌氧菌的分离筛选也是应该着重研究讨论的一部分。另外，对于所研究筛选出来的具有PVC降解效果的菌株，应该进一步研究他们的酶学特征，探究有效降解菌所产生的胞外酶对PVC是否具有降解效果。