野生型CantonS品系黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster),由北京大学生命科学学院提供。
蔗糖(分析纯,天津市化学试剂一厂,批号:20090410);琼脂(细菌学级,产地日本,批号:20090328);丙酸(分析纯,天津市光复精细化工研究所,批号:20091008);酵母粉(食品级,安琪酵母股份有限公司,批号:20181221);玉米粉(食品级);刺五加浸膏(刺五加苷B含量为0.546%,刺五加苷E含量为0.328%,由黑龙江中医药大学中药药理教研室提供);二氧化碳(CO2)麻醉装置(自制);果蝇雌雄分离装置(自制);果蝇活动监测系统(drosophilaactivitymonitorsystem,DAMS)(版本v3.03,TrikineticsInc.Waltham,MA,USA)。
以7日龄野生型CantonS品系黑腹果蝇作为观察对象。收集8h内羽化未交配的果蝇,CO2轻微麻醉后区分雌、雄,随机分为空白对照组、模型对照组,低、中、高浓度给药组,每组32只。将新生果蝇置于相应环境中饲养,待用。
1.5.1果蝇培养基的制备①基础培养基制备。将玉米粉42g与三级水160mL充分搅拌混匀,配成A溶液备用。将蔗糖31g、琼脂3g和三级水300mL充分搅拌、混匀,加热煮沸至琼脂完全融化,将上述A溶液缓慢加入,并不断搅拌,煮沸至糊状后停止加热。待温度降至约70℃,加入酵母粉3g,充分搅拌,接着加入丙酸3mL,并快速搅拌均匀,趁热立即分装于洁净的培养基管中(培养基若不慎附于管壁上,应舍去重新分装),厚度约2cm,待培养基完全凝固后,将培养管倒置于操作室内,静置24h后方可使用。②含药培养基配制。准确称取不同质量的刺五加浸膏,见表1,同法进行制备,浸膏与酵母粉同时加入,充分搅拌使其均匀分散。
Tab.1Formulationofmedicatedmediumwithdifferentconcentrations
Fig.1SleepwakerhythmofmaleDrosophilamelanogasterafterAcanthopanaxsenticosusinterventionafterAcanthopanaxsenticosusinterventionThewhiteisactivity,theblackissleep.
Fig.2SleepwakerhythmoffemaleDrosophilamelanogasterafterAcanthopanaxsenticosusinterventionThewhiteisactivity,theblackissleep.
①与空白对照组比较,t=2.832~2.993,P<0.01;②与模型对照组比较,t=2.609~3.768,P<0.01;③与模型对照组比较,t=-1.723,P<0.05。