通常，多糖的生物活性与其分子大小、单糖成分、糖苷键特征等化学性质有关。从红藻海索面中分离出一种硫酸化甘露聚糖（N6）和两种木甘露聚糖（N3和N4）。这些甘露聚糖的线性骨架为（1→3）连接的α-D-吡喃甘露糖单元，在4-或6-位有硫酸基，D-木糖侧链连接在木甘露聚糖的2-位。N3和N4发挥了明显的免疫调节活性，而N6的这种活性没有确定。有研究报道了一种新型的来自海带的水溶性多糖（LJP-31），该多糖具有显著的免疫调节活性。LJP-31主要由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成，摩尔比为1.0∶7.8∶6.6∶0.8，甘露糖由（1→4）和（1→3,6）糖苷键连接，葡萄糖由（1→4）糖苷键连接，其他两种单糖由（1→）糖苷键连接。
因此，在本研究中，厦门医学高等专科学校的JingnaWu、福建省水产研究所的ZhiyuLiu等评价了一种来自红毛菜（Bangiafuscopurpurea）的新型水溶性多糖，指定为BFP-3，并描述了BFP-3的分离、结构表征和生物活性评价。
将粗多糖（BFP）从红毛菜的热水提取物中分离出来，然后进行乙醇沉淀、脱蛋白和冻干。然后尝试通过生物活性导向纯化程序从BFP中筛选出抗肿瘤多糖。如图1所示，用0.5mol/LNaCl洗脱的BFP-2部分对A2780、COC1、SKOV3、HO-8910和OVCAR3细胞具有较高的抗肿瘤活性，IC50值分别为23.69、40.51、36.45、38.42和30.91μg/mL。
A.A2780；B.COC1；C.SKOV3；D.HO-8910；E.OVCAR3。
图1红毛菜多糖级分对细胞系增殖的影响
根据用BFP-3处理不同浓度的A2780、COC1、SKOV3、HO-8910和OVCAR3细胞的体外细胞活力，BFP-3在所有浓度的人卵巢癌细胞系中均表现出潜在的抗增殖活性。此外，IC50值分别低至5.39、17.12、14.56、10.08和13.85μg/mL（图2）。因此得出结论，多糖纯化后的抗肿瘤活性明显增强。这一结果与其他作者的报道一致。
BFP-3结构
BFP-3部分酸水解后，采用GC-MS方法分析透析后截留物和渗透物的单糖成分，GC-MS曲线如图2所示。根据部分酸水解结果，BFP-3-0.2E中Rha、Ara、Gal的摩尔比高于BFP-3-0.2I，而Man和Glu的摩尔比低于BFP-3-0.2I。这些结果表明，Rha、Ara和Gal残基比Man和Glu残基对这种弱酸更敏感，这可能是由于它们的连接和在侧链中的位置。
A.BFP-3-0.2I；B.BFP-3-0.2E；C.BFP-3-0.6I；D.BFP-3-0.6E；E.BFP。
图2部分酸水解的GC-MS曲线和甲基化分析
将BFP-3-0.2I用0.6mol/LTFA进一步水解，得到BFP-3-0.6I和BFP-3-0.6E。单糖组成分析表明，BFP-3-0.6I中Rha和Gal的摩尔比低于BFP-3-0.6E，而Ara、Man和Glu的摩尔比高于BFP-3-0.6E。在BFP-3-0.6I中，Rha被完全水解，而Gal的摩尔比仅为0.09。因此，本研究认为Rha和Gal很可能位于侧链中。BFP-3-0.6I中Ara的摩尔比高于BFP-3-0.6E，说明Ara可能位于骨架上。
选择核磁共振用于提供更精确的结构信息，包括α-或β-同分异构体配置、连接模式和糖残基的序列。信号的分配和糖单位的识别是通过二维光谱的组合以及与化学位移和报告数据的比较来完成的。BFP-3的1H和13CNMR光谱（图3）聚集在3.2～5.5ppm（1H）和60～110ppm（13CNMR）的狭窄区域，是典型的多糖，δ5.11和5.25ppm处的主要同分异构质子信号和δ104.56、103.95、103.24、102.24、99.34ppm处的同分异构碳信号揭示了BPF-3可能含有5种单糖残基。δ83.39、81.78、80.93、79.85、76.42ppm处的主要信号在75～85ppm的区域，说明多糖的C-2、C-3和C-4可能已经被取代，从而引起下移。δ68.67、62.33ppm处的信号位于高场区，可能是C-6(5)的信号峰。
A.1H光谱图；B.13CNMR光谱图。
图3纯化多糖BFP-3的NMR光谱
通过应用1H/13CHSQC和1H/1HNOESY对糖残基进行分配（图4）。从单糖组成和甲基化结果中得到的结果表明，从HSQC中得到的1,4-键合-Glcp、1,4-键合-Galp和1,3-键合-Galp的比例较高。根据HSQC光谱和文献数据，δ5.24/102.3、4.43/104.2和4.52/104.3ppm处的同分异构体质子和碳信号分别对应于1,4-键合-Glcp、1,4-键合-Galp和1,3-键合-Galp残基。δ5.11/99.3ppm的同分异构体质子和碳信号可能被分配给Man。
A.～C.HSQC光谱；D.NOESY光谱。
图4纯化多糖BFP-3的二维光谱
本研究采用DEAE-SepharoseFastFlow和SephacrylS-100色谱法从红毛菜中分离纯化了一种中性多糖BFP-3。采用GC-MS、部分酸水解、甲基化和一/二维核磁共振对BFP-3进行了表征分析，在体外对其抗肿瘤活性进行了评价。结果显示，BFP-3由5个单糖（Rha、Ara、Man、Glc和Gal）组成，平均重量Mw为333kDa。结构分析表明，BFP-3的骨架由5-α-L-Araf-1→(4-α-D-Glcp-1)4→4,6-β-D-Manp-1的重复单元组成。和侧链由β-D-Galp-1→(4-β-D-Galp-1)4→4,6-β-D-Galp-1→3,4-α-L-Rhap，β-L-Arap-1→(3-β-D-Galp-1)3和β-L-Arap-1的重复单元组成。此外，BFP-3在体外增殖试验中对A2780、COC1、SKOV3、HO-8910和OVCAR3卵巢癌细胞均表现出较强的抑制活性。本研究结果表明，BFP-3对卵巢癌有抑制作用。
JingnaWua,b,*,XiaotingChenc,KunQiaoc,YongchangSuc,ZhiyuLiuac,*
aXiamenKeyLaboratoryofMarineMedicinalNaturalProductsResources,XiamenMedicalCollege,361023,Xiamen,China
bFujianUniversitiesandCollegesEngineeringResearchCenterofMarineBiopharmaceuticalResources,XiamenMedicalCollege,361023,Xiamen,China
cFisheriesResearchInstituteofFujian,361013,Xiamen,China