20世纪二三十年代，利用当时物理化学中的溶液化学平衡理论，动力学理论，如沉淀的生成和共沉淀现象，指示剂作用原理，滴定曲线和终点误差，催化反应和诱导反应，缓冲作用原理大大地丰富了分析化学的内容，并使分析化学向前迈进了一步.
第二个重要阶段
20世纪40年代以后几十年，第二次世界大战前后，物理学和电子学的发展，促进了各种仪器分析方法的发展，改变了经典分析化学以化学分析为主的局面。
原子能技术发展，半导体技术的兴起，要求分析化学能提供各种灵敏准确而快速的分析方法，如，半导体材料，有的要求纯度达99.9999999%以上，在新形势推动下，分析化学达到了迅速发展。最显著的特点是：各种仪器分析方法和分离技术的广泛应用。
第三个重要阶段
自20世纪70年代以来，以计算机应用为主要标志的信息时代的到来，促使分析化学进入第三次变革时期。
由于生命科学、环境科学、新材料科学发展的需要，基础理论及测试手段的完善，现代分析化学完全可能为各种物质提供组成、含量、结构、分布、形态等等全面的信息，使得微区分析、薄层分析、无损分析、瞬时追踪、在线监测及过程控制等过去的难题都迎刃而解。
分析化学广泛吸取了当代科学技术的最新成就，成为当代最富活力的学科之一。
分析方法的分类
1.按原理分：
化学分析:以物质的化学反应为基础的分析方法；
仪器分析:以物质的物理和物理化学性质为基础的分析方法；
光学分析方法：光谱法，非光谱法；
电化学分析法：伏安法，电导分析法等；
色谱法：液相色谱，气相色谱，毛细管电泳；
其他仪器方法：热分析；
2.按分析任务：
定性分析，定量分析，结构分析；
定量分析的操作步骤：
①取样；
②试样分解和分析试液的制备；
③分离及测定；
④分析结果的计算和评价；
3.按分析对象：
无机分析，有机分析，生物分析，环境分析等；
按试样用量及操作规模分：
常量、半微量、微量和超微量分析；
按待测成分含量分：
常量分析(>1%),微量分析(0.01～1%),痕量分析(<0.01％)
细说滴定分析法
（一）对化学反应的要求：
1.有确定的化学计量关系，反应按一定的反应方程式进行；
2.反应要定量进行；
3.反应速度较快；
4.容易确定滴定终点；
（二）滴定方式
1.直接滴定法；
2.间接滴定法；
如，Ca2+沉淀为CaC2O4，再用硫酸溶解，用KMnO4滴定C2O42-，间接测定Ca2+。
3.返滴定法；
如，测定CaCO3，加入过量盐酸，多余盐酸用标准氢氧化钠溶液返滴；
4.置换滴定法：络合滴定多用
（三）基准物质和标准溶液
1.基准物质:
能用于直接配制和标定标准溶液的物质。
要求：
试剂与化学组成一致；
纯度高；
稳定；
摩尔质量大；
滴定反应时无副反应。
2.标准溶液:
已知准确浓度的试剂溶液。
配制方法有直接配制和标定两种。
（四）试样的分解
1.分析方法分为干法分析（原子发射光谱的电弧激发）和湿法分析；
2.试样的分解：注意被测组分的保护
3.常用方法：溶解法和熔融法
对有机试样,灰化法和湿式消化法
（五）常用酸碱标准溶液的配制与标定
酸标准溶液:
HCl(HNO3,H2SO4)
配制:用市售HCl(12mol·L-1),HNO3(16mol·L-1),H2SO4(18mol·L-1)稀释.
标定:Na2CO3或硼砂(Na2B4O7·10H2O)
碱标准溶液:
NaOH
配制:以饱和的NaOH（约19mol·L-1），用除去CO2的去离子水稀释；
标定:邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)或草酸(H2C2O4·2H2O)
（六）酸碱滴定法的应用
NaOH与Na2CO3混合碱的测定；极弱酸的测定；磷的测定；氮的测定；
（七）影响滴定突跃的因素
滴定突跃pM：pcMsp+3.0～lgKMY-3.0
浓度:增大10倍，突跃增加1个pM单位（下限）
KMY:增大10倍，突跃增加1个pM单位（上限）
（八）准确滴定判别式
若ΔpM=±0.2,要求：Et≤0.1%,
根据终点误差公式，可知需lgcMsp·KMY≥6.0
若cMsp=0.010mol·L-1时，则要求lgK≥8.0
多种金属离子共存：例：
M，N存在时，分步滴定可能性的判断：
lgcMsp·KMY≥6.0，考虑Y的副反应aY(H)< cMK'MY≈cMKMY/aY(N)≈cMKMY/cNKNY lgcMK'MY=△lgcK 所以：△lgcK≥6，即可准确滴定M 一般来说，分步滴定中，Et=0.3% △lgcK≥5 如，cM＝cN则以△lgK≥5为判据 分析化学概念对比 （一）准确度和精密度： 1.准确度: 测定结果与真值接近的程度，用误差衡量； 绝对误差: 测量值与真值间的差值，用E表示E=X-XT； 相对误差: 绝对误差占真值的百分比，用Er表示： Er=E/XT=X-XT/XT×100％； 2.精密度: 平行测定结果相互靠近的程度，用偏差衡量。 偏差: 测量值与平均值的差值，用d表示； ①平均偏差： ②相对平均偏差： ④相对标准偏差： 3.准确度与精密度的关系 精密度好是准确度好的前提； 精密度好不一定准确度高； 提高分析结果准确度方法: 选择恰当分析方法（灵敏度与准确度）； 减小测量误差（误差要求与取样量）； 减小偶然误差（多次测量，至少3次以上） 消除系统误差对照实验： 标准方法； 标准样品； 标准加入； 空白实验； 校准仪器； 校正分析结果； （二）各种误差： 系统误差: 又称可测误差，具单向性、重现性、可校正特点； 方法误差: 溶解损失、终点误差－用其他方法校正； 仪器误差: 刻度不准、砝码磨损——校准(绝对、相对)； 操作误差: 颜色观察； 试剂误差: 不纯－空白实验； 主观误差: 个人误差； 随机误差: 又称偶然误差，不可校正，无法避免，服从统计规律； #不存在系统误差的情况下，测定次数越多其平均值越接近真值，一般平行测定4～6次； （三）有效数字: 分析工作中实际能测得的数字，包括：全部可靠数字及一位不确定数字在内； 运算规则： 1.加减法: 结果的绝对误差应不小于各项中绝对误差最大的数。 (与小数点后位数最少的数一致)0.112+12.1+0.3214=12.5。 2.乘除法: 结果的相对误差应与各因数中相对误差最大的数相适应(与有效数字位数最少的一致)； 0.0121×25.66×1.0578＝0.328432； 定量分析数据的评价——解决两类问题: (1)可疑数据的取舍过失误差的判断： 方法: 4d法、Q检验法和格鲁布斯(Grubbs)检验法； 确定某个数据是否可用。 (2)分析方法的准确性系统误差及偶然误差的判断： 显著性检验： 利用统计学的方法，检验被处理的问题是否存在显著性差异。 方法： ①t检验法和F检验法； ②确定某种方法是否可用，判断实验室测定结果准确性； （四）质子条件式 1.物料平衡(Material(Mass)Balance): 各物种的平衡浓度之和等于其分析浓度。 2.电荷平衡(ChargeBalance): 溶液中正离子所带正电荷的总数等于负离子所带负电荷的总数(电中性原则)。 3.质子平衡（ProtonBalance）: 溶液中酸失去质子数目等于碱得到质子数目： (1)先选零水准(大量存在,参与质子转移的物质)，一般选取投料组分及H2O； (2)将零水准得质子产物写在等式一边,失质子产物写在等式另一边； (3)浓度项前乘上得失质子数； 注意：同一种物质，只能选择一个形态作为参考水准； （五）酸度与酸的浓度： 酸度： 溶液中H＋的平衡浓度或活度，通常用pH表示： pH=-lg[H+]； 酸的浓度： 酸的分析浓度； 包含：未解离的和已解离的酸的浓度； 对一元弱酸：CHA＝[HA]+[A-] （六）分布分数： 溶液中某酸碱组分的平衡浓度占其分析浓度的分数，用δ表示： “δ”将平衡浓度与分析浓度联系起来： [HA]＝δHA·cHA，[A-]=δA-cHA； （七）缓冲溶液： 能减缓强酸强碱的加入或稀释而引起的pH变化； 缓冲溶液的选择原则： 不干扰测定，例如，EDTA滴定Pb2+,不用HAc-Ac-； 有较大的缓冲能力，足够的缓冲容量； 常用单一酸碱指示剂： 甲基橙MO（3.1～4.4）甲基红MR（4.4～6.2）酚酞PP（8.0～9.6）； 影响指示剂变色范围的因素： 指示剂用量: 宜少不宜多，对单色指示剂影响较大 离子强度： 影响pKHIn； 温度； （八）吸光光度法： 分子光谱分析法的一种，又称：分光光度法，属于分子吸收光谱分析方法； 基于外层电子跃迁； （九）光吸收定律－朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律 当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系－－朗伯比尔定律； 数学表达： A＝lg(1/T)=Kbc(其中，A:吸光度，T:透射比，K:比例常数，b:溶液厚度，c:溶液浓) 注意： 平行单色光；均相介质；无发射、散射或光化学反应 （十）显色反应及影响因素 显色反应： 没有颜色的化合物，需要通过适当的反应定量生成有色化合物再测定－－显色反应； a.选择性好 b.灵敏度高(ε>104) c.产物的化学组成稳定 d.化学性质稳定 e.反应和产物有明显的颜色差别(Dl>60nm) 显色反应类型： 络合反应； 氧化还原反应；离子缔合反应；成盐反应；褪色反应；吸附显色反应； 显色剂： 无机显色剂: 过氧化氢，硫氰酸铵，碘化钾 有机显色剂： 偶氮类： 偶氮胂III； 三苯甲烷类： 三苯甲烷酸性染料铬天菁S，三苯甲烷碱性染料结晶紫；邻菲罗啉类；新亚铜灵； 肟类：丁二肟 影响因素： a.溶液酸度（pH值及缓冲溶液）： 影响显色剂的平衡浓度及颜色，改变：Δl； 影响待测离子的存在状态，防止沉淀； 影响络合物组成； b.显色剂的用量： 稍过量，处于平台区； 显色反应快且稳定； 显色反应快但不稳定； 显色反应慢但不稳定； d.显色反应温度： 加热可加快反应速度，导致显色剂或产物分解； e.溶剂： 有机溶剂，提高灵敏度、显色反应速率； f.干扰离子： 消除办法： 提高酸度，加入隐蔽剂； 改变价态； 选择合适参比； 褪色空白(铬天菁S测Al，氟化铵褪色，消除锆、镍、钴干扰)； 选择适当波长。 B.痕量组分的富集和共沉淀分离 a.无机共沉淀剂进行共沉淀 利用表面吸附进行痕量组分的共沉淀富集,选择性不高。共沉淀剂为Fe(OH)3,Al(OH)3等胶状沉淀,微溶性的硫化物，如，Al(OH)3作载体共沉淀Fe3+，TiO2+；HgS共沉淀Pb2+。 利用生成混晶进行共沉淀，选择性较好，如，硫酸铅-硫酸鋇，磷酸铵镁-砷酸铵镁等。。。 b.有机共沉淀剂进行共沉淀 利用胶体的凝聚作用进行共沉淀，如，动物胶、丹宁； 离子缔合共沉淀，如，甲基紫与InI4-； 利用“固体萃取剂”进行共沉淀，例，1-萘酚的乙醇溶液中，1-萘酚沉淀并将U(VI)与1-亚硝基-2-萘酚的螯合物共沉淀下来； 色谱分析法 色谱是一种多级分离技术基于被分离物质分子在两相（一为固定相，一为流动相）中分配系数的微小差别进行分离。 a.萃取色谱： 溶剂萃取原理与色谱分离技术相结合的液相分配色谱，又称反相分配色谱。多用于无机离子的分离。以涂渍或吸留于多孔、疏水的惰性支持体的有机萃取剂为固定相，以无机化合物水溶液为流动相支持体材料有： 硅藻土、硅胶、聚四氟乙烯及聚乙烯-乙酸乙烯酯共聚物，活性碳纤维； 惰性多孔且孔径分布均匀，比表面大，在流动相中不膨胀，不吸附水溶液中的离子； 如，正辛胺-纤维素分离Th，Zr，U（10MHCl，6MHCl，0.05MHCl）洗脱。 b.薄层色谱和纸色谱： 平面色谱： 薄层色谱固定相有硅胶，活性氧化铝及纤维素并铺在玻璃板上,纸色谱固定相多为滤纸。 *流动相或展开剂： 正相薄层色谱中为含有少许酸或碱的有机溶剂；反相色谱多采用无机酸水溶液； 正丁醇－乙醇－氨水（9：1：0.5）分离显色剂AClP-PF； 纸色谱用无机酸水溶液或其与有机溶剂的混合物为流动相； 乙醇－2MHCl（9:1）分离La，Ce，Pm，Eu，Dy等； 丁酮－HF（6：1）单宁显色分离Nb和Ta。 原子光谱 （一）原子吸收光谱 1.原子吸收光谱法（AAS）： 是基于气态的基态原子外层电子对紫外光和可见光范围的相对应原子共振辐射线的吸收强度来定量被测元素含量为基础的分析方法。 2.原子吸收光谱的产生： 处于基态原子核外层电子，如果，外界所提供特定能量（E）的光辐射恰好等于核外层电子基态与某一激发态（i）之间的能量差（ΔEi）时，核外层电子将吸收特征能量的光辐射由基态跃迁到相应激发态，从而，产生原子吸收光谱。 3.原子吸收谱线的轮廓： ①自然宽度ΔυN： 它与原子发生能级间路迂时激发态原子的有限寿命有关，一般情况下：约相当于10-4。 ②多普勤（Doppler）宽度ΔυD： 这是由原子在空间作无规热运动所引致的，故，又称热变宽。 碰撞变宽： 原子核蒸气压力愈大，谱线愈宽。同种粒子碰撞——赫尔兹马克(Holtzmank)变宽,异种粒子碰撞——称罗论兹（Lorentz）变宽，10-2。 场致变宽： 在外界电场或磁场的作用下，引起原子核外层电子能级分裂而使谱线变宽现象称为场致变宽。由于磁场作用引起谱线变宽，称为：Zeeman(塞曼)变宽。 自吸变宽： 光源空心阴极灯发射的共振线被灯内同种基态原子所吸收产生自吸现象。 （二）原子发射光谱 原子发射光谱法的分类: 目视火焰光分析法；火焰光度法；摄谱法；光电直读法 原子发射光谱法的特点: 灵敏度和准确度较高；选择性好，分析速度快；试样用量少，测定元素范围广。 局限性: （1）样品的组成对分析结果的影响比较显著，因此，进行定量分析时，常常需要配制一套与试样组成相仿的标准样品，这就限制了该分析方法的灵敏度、准确度和分析速度等的提高。 （2）发射光谱法，一般只用于元素分析，而不能用来确定元素在样品中存在的化合物状态，更不能用来测定有机化合物的基团；对一些非金属，如惰性气体、卤素等元素几乎无法分析。 （3）仪器设备比较复杂、昂贵。 原子发射光谱的产生: 原子的核外电子一般处在基态运动，当获取足够的能量后，就会从基态跃迁到激发态，处于激发态不稳定（寿命小于10-8s），迅速回到基态时，就要释放出多余的能量，若此能量以光的形式出显，既得到发射光谱。 ΔE=E2-E1λ=hc/E2-E1 =hc/λυ=c/λ =hυσ=1/λ =hσc h:为普朗克常数（6.626×10-34J·s）； c:为光速(2.997925×1010cm/s)； 1.发射: 当原子、分子和离子等处于较高能态时，可以以光子形式释放多余的能量而回到较低能态，产生电磁辐射，这一过程叫做发射跃迁。 2.原子发射: 当气态自由原子处于激发态时，将发射电磁波而回到基态，所发射的电磁波处于紫外或可见光区。通常采用的电、热或激光的形式使样品原子化并激发原子，一般将原子激发到以第一激发态为主的有限的几个激发态，致使原子发射具有限的特征频率辐射，即特定原子只发射少数几个具有特征频率的电磁波。 3.分子发射: 通过光激发而处于高能态的原子和分子的寿命很短，它们一般通过不同的弛豫过程返回到基态，这些弛豫过程分为辐射弛豫和非辐射弛豫。辐射弛豫通过分子发射电磁波的形式释放能量，而非辐射弛豫通过其他形式释放能量。 （三）基于原子、分子外层电子能级跃迁的光谱法 包括：原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、分子荧光光谱法、分子磷光光谱法、化学发光分析法，吸收或发射光谱的波段范围在紫外-可见光区，即，200nm～800nm之间。 对于原子来讲，其外层电子能级和电子跃迁相对简单，只存在不同的电子能级，因此其外层电子的跃迁仅仅在不同电子能级之间进行，光谱为线光谱。 对于分子来讲，其外层电子能级和电子跃迁相对复杂，不仅存在不同的电子能级，而且存在不同的振动和转动能级，宏观上光谱为连续光谱，即带光谱。 （四）原子荧光光谱法 气态自由原子吸收特征波长的辐射后，原子外层电子从基态或低能态跃迁到高能态，约经10-8s，又跃迁至基态或低能态，同时，发射出与原激发波长相同或不同的辐射，称为原子荧光。 （五）紫外-可见吸收光谱法 紫外-可见吸收光谱是一种分子吸收光谱法，该方法利用分子吸收紫外-可见光，产生分子外层电子能级跃迁所形成的吸收光谱，可进行分子物质的定量测定，其定量测定基础是Lambert-Beer定律。 （六）分子荧光光谱法和分子磷光光谱法 分子吸收电磁辐射后激发至激发单重态并通过内转移和振动驰豫等非辐射驰豫释放部分能量而到达第一激发单重态的最低振动能层，然后通过发光的形式跃迁返回到基态，所发射的光即为荧光。 当分子吸收电磁辐射后激发至激发单重态，并通过内转移、振动驰豫和系间窜跃等非辐射驰豫释放部分能量而到达第一激发三重态的最低振动能层，然后通过发光的形式跃迁返回到基态，所发射的光即为磷光。 （七）基于分子转动、振动能级跃迁的光谱法 基于分子转动、振动能级跃迁的光谱法即红外吸收光谱法，红外吸收光谱的波段范围在近红外光区和微波光区之间，即，750nm～1000μm之间，是复杂的带状光谱。 不存在电子能级之间的跃迁，只存在振动能级和转动能级之间的跃迁，而分子中官能团的各种形式的振动和转动直接反映在分子的振动和转动能级上，分子精细而复杂的振动和转动能级，蕴涵了大量的分子中各种官能团的结构信息，因此，只要能精细地检测不同频率的红外吸收，就能获得分子官能团结构的有效信息。通常情况下，红外吸收光谱是一种有效的结构分析手段。 总结：光谱法的分类 石墨炉原子化法(GFAAS) 特点： 采用直接进样和程序升温方式，原子化温度曲线是一条具有峰值的曲线。 可达3500℃高温，且升温速度快。 绝对灵敏度高，一般元素的可达10-9～10-12g。 可分析70多种金属和类金属元素。 所用样品量少（1～100mL）。 但是，石墨炉原子化法的分析速度较慢，分析成本高，背景吸收、光辐射和基体干扰比较大。 物理干扰： 指样品溶液物理性质变化而引起吸收信号强度变化，物理干扰属非选择性干扰。 物理干扰一般都是负干扰。 消除方法： 配制与待测样品溶液基体相一致的标准溶液； 采用标准加入法； 被测样品溶液中元素的浓度较高时，采用稀释方法来减少或消除物理干扰。 化学干扰： 待测元素在原子化过程中，与基体组分原子或分子之间产生化学作用而引起的干扰。 改变火焰类型、改变火焰特性、加入释放剂、加入保护剂、加入缓冲剂、采用标准加入法。 背景干扰也是光谱干扰，主要指：分子吸与光散射造成光谱背景。分子吸收是指在原子化过程中生成的分子对辐射吸收，分子吸收是带光谱。光散射是指原子化过程中产生的微小的固体颗粒使光产生散射，造成透过光减小，吸收值增加，背景干扰，一般使吸收值增加，产生正误差； 质谱分析法 质谱法(MassSpectrometry)： 离子源： 1.高频火花离子源； 2.电感耦合等离子体离子源； 3.辉光放电离子源； 4.其他离子源： (1)激光离子源； (2)离子轰击离子源； 质量分析器： 磁质量分析器；四极滤质器；离子回旋共振分析器（IonCyclotronResonance，ICR） 电感耦合等离子体质谱法 优点： 试样在常温下引入； 气体的温度很高使试样完全蒸发和解离； 试样原子离子化的百分比很高； 产生的主要是一价离子； 离子能量分散小； 外部离子源，即离子并不处在真空中； 离子源处于低电位，可配用简单的质量分析器。 干扰及消除方法： 1.同质量类型离子：同质量类型离子干扰是指两种不同元素有几乎相同质量的同位素； 2.多原子离子干扰：一般认为，多原子离子并不存在于等离子体本身中，而是在离子的引出过程中，由等离子体中的组分与基体或大气中的组分相互作用而形成； 3.氧化物和氢氧化物干扰4.仪器和试样制备所引起的干扰。 紫外－可见吸收光谱法 基于物质对200～800nm光谱区辐射的吸收特性建立起来的分析测定方法称为紫外-可见吸收光谱法或紫外-可见分光光度法。它具有如下特点： 1.灵敏度高，可以测定10-7～10-4g·mL-1的微量组分。 2.准确度较高，其相对误差一般在1%～5%之内。 3.仪器价格较低，操作简便、快速。 4.应用范围广。 紫外吸收光谱：200～400nm 可见吸收光谱：400～800nm 两者都属电子光谱。 紫外-可见吸收光谱的定量依据仍然是Lamber-Beer(朗伯-比耳)定律。 影响紫外-可见吸收光谱的因素： 共轭效应： 共轭效应使共轭体系形成大p键，结果使各能级间的能量差减小，从而跃迁所需能量也就相应减小，因此共轭效应使吸收波长产生红移。共轭不饱和键越多，红移越明显，同时吸收强度也随之加强。 溶剂效应： 溶剂极性对光谱精细结构的影响； 溶剂化限制了溶质分子的自由转动，使转动光谱表现不出来，如果，溶剂的极性越大，溶剂与溶质分子间产生的相互作用就越强，溶质分子的振动也越受到限制，因而由振动而引起的精细结构也损失越多； 溶剂极性对pp*和np*跃迁谱带的影响 当溶剂极性增大时，由pp*跃迁产生的吸收带发生红移，np*跃迁产生的吸收带发生蓝移 溶剂的选择： 尽量选用非极性溶剂或低极性溶剂； 溶剂能很好地溶解被测物，且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性； 溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 pH值的影响： 如果化合物在不同的pH值下存在的型体不同，则其吸收峰的位置会随pH值的改变而改变。 紫外-可见分光光度计： 仪器的基本构造： 紫外-可见分光光度计都是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号指示系统五个部分构成。 仪器类型： 紫外-可见分光光度计主要有以下几种类型： 单光束分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计和多通道分光光度计。 红外吸收光谱法 红外吸收光谱法是利用物质分子对红外辐射的特征吸收，来鉴别分子结构或定量的方法。 红外光谱属于分子振动光谱，由于分子振动能级跃迁伴随着转动能级跃迁，为带状光谱。 红外光谱最重要的应用是中红外区有机化合物的结构鉴定。也可用于定量分析。 （一）基本原理 样品受到频率连续变化的红外光照射时，样品分子选择性地吸收某些波数范围的辐射，引起偶极矩的变化，产生分子振动和转动能级从基态到激发态的跃迁并使相应的透射光强度减弱。 红外光谱中，吸收峰出现的频率位置由振动能级差决定，吸收峰的个数与分子振动自由度的数目有关，而吸收峰的强度则主要取决于振动过程中偶极矩的变化以及能级的跃迁概率。 （二）产生红外吸收的条件 分子吸收辐射产生振转跃迁必须满足两个条件： 条件一：辐射光子的能量应与振动跃迁所需能量相等。 根据量子力学原理，分子振动能量E振是量子化的，即E振=（V+1/2）hn n为分子振动频率，V为振动量子数，其值取0，1，2，… 分子中不同振动能级差为 DE振=DVhn 也就是说，吸收光子的能量（hna）要与该能量差相等，即，na=DVn时，才可能发生振转跃迁。例如当分子从基态（V=0）跃迁到第一激发态（V=1），此时DV=1，即，na=n （三）简正振动基本形式 伸缩振动n： 原子沿键轴方向伸缩，键长变化但键角不变的振动。 变形振动d： 基团键角发生周期性变化，但键长不变的振动。又称弯曲振动或变角振动。 理论上，多原子分子的振动数应与谱峰数相同，但实际上，谱峰数常常少于理论计算出的振动数，这是因为： a）偶极矩的变化Dm=0的振动，不产生红外吸收； b）谱线简并（振动形式不同，但其频率相同）； c）仪器分辨率或灵敏度不够，有些谱峰观察不到。 以上介绍了基本振动所产生的谱峰，即，基频峰（DV=±1允许跃迁）。 在红外光谱中还可观察到其它跃迁谱峰： 倍频峰：由基态向第二、三….振动激发态的跃迁（DV=±2、±3.）； 合频峰：分子吸收光子后，同时发生频率为n1，n2的跃迁，此时 产生的跃迁为n1+n2的谱峰。 差频峰：当吸收峰与发射峰相重叠时产生的峰n1-n2。 泛频峰可以观察到，但很弱，可提供分子的“指纹”。 （四）影响基团频率的因素 分子内部结构因素: 电子效应 包括：诱导效应、共轭效应和中介效应。 （1）诱导效应(Inductioneffect)： 取代基电负性—静电诱导—电子分布改变—k增加—特征频率增加（移向高波数）。 （2）共轭效应(Conjugatedeffect)： 电子云密度均化—键长变长—k降低—特征频率减小（移向低波数）。 （3）中介效应（Mesomericeffect）： 孤对电子与多重键相连产生的p-p共轭，结果类似于共轭效应。当诱导与共轭两种效应同时存在时，振动频率的位移和程度取决于它们的净效应。 空间效应： 包括：空间位阻效应、环状化合物的环张力效应等。 取代基的空间位阻效应使分子平面与双键不在同一平面，此时共轭效应下降，红外峰移向高波数。如下面两个结构的分子，其波数就反映了空间位阻效应的影响。 氢键： 氢键的形成使电子云密度平均化（缔合态），使体系能量下降，X-H伸缩振动频率降低，吸收谱带强度增大、变宽；变形振动频率移向较高波数处，但，其变化没有伸缩振动显著。 形成分子内氢键时，X-H伸缩振动谱带的位置、强度和形状的改变均较分子间氢键小。 同时，分子内氢键的影响不随浓度变化而改变，分子间氢键的影响则随浓度变化而变化。 互变异构 分子有互变异构现象存在时，各异构体的吸收均能从其红外吸收光谱中反映出来。 振动耦合 当两个振动频率相同或相近的基团相邻并具有一公共原子时，两个键的振动将通过公共原子发生相互作用，产生“微扰”。其结果是使振动频率发生变化，一个向高频移动，另一个向低频移动。振动耦合常出现在一些二羰基化合物中，如，羧酸酐分裂为as1820、s1760cm-1 Fermi共振 当弱的泛频峰与强的基频峰位置接近时，其吸收峰强度增加或发生谱峰分裂，这种泛频与基频之间的振动耦合现象称为Fermi共振。 外界环境因素: 1）试样状态 通常，物质由固态向气态变化，其波数将增加。如丙酮在液态时，nC=O=1718cm-1;气态时nC=O=1742cm-1，因此在查阅标准红外图谱时，应注意试样状态和制样方法。 2）溶剂效应 极性基团的伸缩振动频率通常随溶剂极性增加而降低，如，羧酸中的羰基C=O： 气态时：nC=O=1780cm-1 非极性溶剂：nC=O=1760cm-1 乙醚溶剂：nC=O=1735cm-1 乙醇溶剂：nC=O=1720cm-1 因此红外光谱通常需在非极性溶剂中测量。 （五）红外光谱仪 目前，有两类红外光谱仪： 见下图：色散型和干涉型（傅立叶变换红外光谱仪）（FourierTransfer，FT） 3.单色器 由色散元件、准直镜和狭缝构成。其中可用几个光栅来增加波数范围，狭缝宽度应可调。 狭缝越窄，分辨率越高，但光源到达检测器的能量输出减少，这在红外光谱分析中尤为突出。为减少长波部分能量损失，改善检测器响应，通常采取程序增减狭缝宽度的办法，即随辐射能量降低，狭缝宽度自动增加，保持到达检测器的辐射能量的恒定。 4.检测器及记录仪 红外光能量低，因此常用热电偶、测热辐射计、热释电检测器和碲镉汞检测器等。 傅里叶变换红外光谱仪具有以下优点：灵敏度高。扫描速度快。分辨率高。测量光谱范围宽（1000～10cm-1），精度高（±0.01cm-1），重现性好（0.1%）。还有杂散光干扰小。样品不受因红外聚焦而产生的热效应的影响。 核磁共振波谱法 将磁性原子核放入强磁场后，用适宜频率的电磁波照射，它们会吸收能量，发生原子核能级跃迁，同时产生核磁共振信号，得到核磁共振: a.屏蔽常数 任何原子核都被电子云所包围,当1H核自旋时,核周围的电子云也随之转动，在外磁场作用下，会感应产生一个与外加磁场方向相反的次级磁场，实际上会使外磁场减弱，这种对抗外磁场的作用称为屏蔽效应。 影响屏蔽常数的因素： 原子屏蔽原子屏蔽可指孤立原子的屏蔽，也可指分子中原子的电子壳层的局部屏蔽，称为近程屏蔽效应。 分子内屏蔽： 指分子中其他原子或原子团对所要研究原子核的磁屏蔽作用。 分子间屏蔽： 指样品中其他分子对所要研究的分子中核的屏蔽作用。影响这一部分的主要因素有溶剂效应、介质磁化率效应、氢键效应等。。。 b.化学位移有两种表示方法： 1.用共振频率差()表示，单位Hz。 由于s是个常数，因此共振频率差与外磁场的磁感应强度B0呈正比。这样同一磁性核，用不同磁场强度的仪器测得的共振频率差是不同的。所以用这种方法表示化学位移时，需注明外磁场的磁感应强度B0。 2.用d值表示 化学位移定义为： 该表达式也适用于脉冲NMR法。 c.自旋－自旋耦合和耦合常数J 氢核吸收峰的裂分是因为分子中相邻氢核之间发生了自旋相互作用，自旋核之间的相互作用称为自旋—自旋偶合。自旋偶合不影响化学位移，但会使吸收峰发生裂分，使谱线增多，简称自旋裂分。 偶合常数 自旋偶合产生峰裂分后，裂分峰之间的间距称为偶合常数，用J表示，单位为Hz。 J值大小表示氢核间相互偶合作用的强弱。与化学位移不同，不因外磁场的变化而变化，受外界条件的影响也很小。偶合常数有以下规律： （1）J值的大小与B0无关。影响J值大小的主要因素是原子核的磁性和分子结构及构象。因此，偶合常数是化合物分子结构的属性。 （2）简单自旋偶合体系J值等于多重峰的间距，复杂自旋偶合体系需要通过复杂计算求得。 超过三个化学键的J耦合一般较弱。 自旋－自旋耦合分裂的规律: 由于邻近核的耦合作用，NMR谱线发生分裂。在一级近似下，谱线分裂的数目N与邻近核的自旋量子数I和核的数目n有如下关系： 当I=1/2时，N=n+1，称为“n+1规律”。谱线强度之比遵循二项式展开式的系数比，n为引起耦合分裂的核数。下面以“—CH2CH3”基团的HNMR谱线分裂情况为例进行说明。 自旋裂分峰数目及强度: （1）化学环境完全相同的原子，虽然它们有很强的偶合作用，但无裂分现象： 例，-CH3不发生裂分。 （2）分子中化学位移相同的氢核称为化学等价核；把化学位移相同，核磁性也相同的称为磁等价核。磁等价核之间虽有偶合作用，但是，无裂分现象，在NMR谱图中为单峰： 例如，Cl-CH2-CH2-Cl分子中，-CH2上的氢核皆是磁等价核，出现的信号强度相当于4个H核的单峰 化学位移相同，偶合常数也相同，磁等价核一定是化学等价核。 磁不等价核之间才能发生自旋偶合裂分。如下情况是磁不等价氢核 A.化学环境不相同的氢核； B.与不对称碳原子相连的-CH2上的氢核； C.固定在环上的-CH2中的氢核； D.单键带有双键性质时，会产生磁不等价氢核； E.单键不能自由旋转时，也会产生磁不等价氢核。 （3）一组相同氢核自旋裂分峰数目由相邻氢核数目n决定 裂分峰数目遵守n+1规律——相邻n个H，裂分成n+1峰 氢核相邻一个H原子，H核自旋方向有两种，两种自旋取向方式 ↑↓（↑顺着磁场方向，↓反着磁场方向） 氢核相邻两个H原子，H核自旋方向有四种，四种自旋取向方式 ↑↑1/4 ↑↓1/4 ↓↑1/4 ↓↓1/4 氢核相邻三个H原子，H核裂分为四重峰。强度比为1︰3︰3︰1 （4）裂分峰之间的峰面积或峰强度之比符合二项展开式各项系数比的规律。（a+b）n，n为相邻氢核数 n=1（a+b）11︰1 n=2（a+b）21︰2︰1 n=3（a+b）31︰3︰3︰1 （5）氢核邻近有两组偶合程度不等的H核时，其中一组有n个，另一组有n′+1个，则这组H核受两组H核自旋偶合作用，谱线裂分成(n+1)(n′+1)重峰。 谱仪的基本组件 磁体： 产生强的静磁场。 射频源： 用来激发核磁能级之间的跃迁。 探头： 位于磁体中心的圆柱形探头作为NMR信号检测器，是NMR谱仪的核心部件。样品管放置于探头内的检测线圈中。 接收机： 用于接收微弱的NMR信号，并放大变成直流的电信号。 匀场线圈： 用来调整所加静磁场的均匀性，提高谱仪的分辨率。 计算机系统： 用来控制谱仪，并进行数据显示和处理。 连续波NMR谱仪 NMR信号观测系统： 包括：射频激发单元、探头、接收系统等。 稳定磁场系统： 包括：电源、稳场系统等，用来提高磁场强度的稳定性，从而提高谱线的重复性。 磁场均匀化系统： 包括：匀场系统、样品旋转系统等，主要用来提高仪器的分辨率。 此外，NMR谱仪还常常配备有双共振系统和变温系统等。 脉冲傅里叶变换NMR谱仪 包含以下三大部分： 1.NMR信号观测系统： 包括脉冲发生器、射频系统、探头、接收系统、计算机控制和数据处理系统。 2.稳定磁场系统： 与连续波NMR谱仪基本一样。 3.磁场均匀化系统： 波谱仪的三大技术指标 1.辨率： 有相对和绝对分辨率，表征波谱仪辨别两个相邻共振信号的能力，即能够观察到两个相邻信号u1和u2各自独立谱峰的能力，以最小频率间隔|u1-u2|表示。 2.稳定性： 3.灵敏度： 分为相对灵敏度和绝对灵敏度。在外磁场相同、核数目相同及其他条件一样时，以某核灵敏度为参比，其他核的灵敏度与之相比称为相对灵敏度。 氢谱中影响化学位移的主要因素 化合物中，质子不是孤立存在，其周围还连接着其他的原子或基团，它们彼此之间的相互作用影响质子周围的电子云密度，从而使吸收峰向低场或高场移动。 影响质子化学位移的因素主要有： 诱导效应、共轭效应、磁各向异性效应、范德华效应、溶剂效应和氢键效应等。 其中诱导效应、共轭效应、磁各向异性效应和范德华效应为分子内作用。 溶剂效应为分子间作用，氢键效应则在分子内和分子间都会产生。 诱导效应 1H核受一个或几个电负性较强原子或基团的拉电子作用，则周围的电子云密度降低，屏蔽效应降低，化学位移值增大，吸收峰左移。 若1H核与一个或几个给电子基团连接，则其周围的电子云密度增加，屏蔽效应增加，化学位移值减小，吸收峰右移。 诱导效应还与取代基的数目以及取代基与观测核的距离大小有关。 共轭效应 电负性较强的原子存在并以单键形式连接到双键上，由于发生p-p共轭，电子云自电负性原子向p键方向移动，使p键上相连的1H电子云密度增加，因此δ降低，共振吸收移向高场。 电负性较强的原子以不饱和键的形式连接，且产生p-p共轭，则电子云将移向电负性原子，使p键上连接的1H电子云密度降低，因此δ变大，共振吸收移向高场。 磁各向异性效应： 如果分子具有多重键或共轭多重键，在外磁场作用下，p电子会沿着分子的某一方向流动，它对邻近的质子附加一个各向异性的磁场，使某些位置的质子处于该基团的屏蔽区，δ值移向高场，而另一些位置的质子处于该基团的去屏蔽区，δ值移向低场。 诱导效应通过化学键传递，而磁各向异性效应则通过空间相互作用。 范德华效应： 当两个原子相互靠近时，由于受到范德华力作用，电子云相互排斥，导致原子核周围电子云密度降低，屏蔽减小，谱线向低场移动，这种效应称为范德华效应。 氢的化学位移对氢键很敏感。当分子形成氢键后，由于静电场的作用，使氢外围电子云密度降低而去屏蔽，δ值增加，也就是说，无论是分子内还是分子间氢键的形成都使氢受到去屏蔽作用。 同一化合物在不同溶剂中的化学位移会有所差别，这种由于溶质分子受到不同溶剂影响而引起的化学位移变化。 碳谱中影响化学位移的主要因素 1.碳的轨道杂化 δc值受碳原子杂化的影响，其次序与δH平行，一般情况下，屏蔽常数。 2.诱导效应 3.空间效应 13C化学位移对分子的几何形状非常敏感，分子的空间构型对其影响很大。相隔几个键的碳，如果它们的空间距离非常近，将互相发生强烈的影响。 4.共轭效应 5.电场效应： 带电基团引起的屏蔽作用，如解离后的羧基、质子化的氨基等。基团质子化后，其α和β碳向高场位移约d0.15～4，而g和d碳的位移小于d1。 6.重原子效应： 电负性取代基对被取代的脂肪碳的屏蔽影响主要为诱导效应。 7.同位素效应： 分子中的质子被其重同位素氘(2H)取代后，由于平均电子激发能的增加，导致相连碳的化学位移值减小，称为同位素效应。 8.分子内氢键 9.介质效应 电位分析法 定义： 利用电极电位与浓度的关系测定物质含量的电化学分析法称为电位分析法。 a.参比电极: 对参比电极的要求要有“三性” （1）可逆性有电流流过（μA）时，反转变号时，电位基本上保持不变。 （2）重现性溶液的浓度和温度改变时，按Nernst响应，无滞后现象。 （3）稳定性测量中电位保持恒定、并具有长的使用寿命。例:甘汞电极（SCE）,银-氯化银电极等。 b.盐桥是“联接”和“隔离”不同电解质的重要装置： （1）作用 接通电路，消除或减小液接电位。 （2）使用条件 a.盐桥中电解质不含有被测离子。 b.电解质的正负离子的迁移率应该基本相等。 c.要保持盐桥内离子浓度的离子强度5～10倍于被测溶液。常用作盐桥的电解质有：KCl，NH4Cl，KNO3等。 电解与库仑分析 电解分析(electrolyticanalysis)包括两种方法： 1.利用外电源将被测溶液进行电解，使欲测物质能在电极上析出，然后称析出物的重量，算出该物质在样品中的含量，这种方法称为电重量分析法（electrolyticgavimetry）； 2.使电解的物质由此得以分离，而称为电分离分析法(electrolyticseparation)。 库仑分析法（coulometry）是在电解分析法的基础上发展起来的一种分析方法。它不是通过称量电解析出物的重量，而是通过测量被测物质在100％电流效率下电解所消耗的电量来进行定量分析的方法,定量依据是法拉第定律。