导语：如何才能写好一篇细胞骨架，这就需要搜集整理更多的资料和文献，欢迎阅读由公务员之家整理的十篇范文，供你借鉴。
1材料与方法
1.1实验材料及试剂
人骨骼肌细胞株（HSKMC）从中国科学院昆明细胞所购买。流式细胞仪购自BD公司，Fluo-3AM钙离子荧光探针试剂盒购自invitrogen公司，Olympus荧光显微镜，细胞周期与凋亡检测试剂盒购自武汉碧云天公司。
1.2方法
1.2.1HSKMC细胞培养HSKMC细胞复苏后，将细胞收入离心管中，1000r/min离心10min，弃上清，用高糖DMEM培养液（含20%胎牛血清，100000U/L青霉素、100mg/L链霉素）混匀细胞，转入25mL玻璃培养瓶中，在37℃、5%CO2浓度及饱和湿度条件下培养，次日换液，以后根据细胞生长情况每48～72h更换培养液一次，每周传代1～2次。[选自《中华急诊医学杂志》2014年第8期,专业提供写作论文服务，欢迎光临.]
2结果
2.1热打击对HSKMC细胞膜通透性的影响
流式细胞仪检测结果提示，给予培养人HSKMC细胞不同温度梯度热打击1h后，如图1所示，43℃热打击组钙离子流式检测的中位数为91.63，37℃对照组中位数为22.98。
2.2热打击对HSKMC细胞骨架影响
本实验中，同对照组相比，随着热打击程度加强，显微镜高倍镜下可见骨骼肌细胞骨架逐渐出现变粗、变短、出现明显的应力纤维，见图2。
2.3热打击对HSKMC细胞细胞周期改变
同正常对照组相比，骨骼肌细胞在热打击情况下，DNA含量与细胞周期中各期百分构成比统计结果分别见图3及表1。3讨论
胞浆Ca2+是细胞的第2信使。细胞内钙不仅作为一种重要的第2信使广泛参与细胞的运动、分泌、代谢和分化等多种细胞功能活动的调节，而且胞内钙离子浓度的变化与调控对于参与维持存在于细胞质膜或细胞器膜两侧的跨膜梯度差，以及介导细胞对外界刺激的应答反应具有重要的调节作用[13]。研究发现，钙在细胞损伤过程中起重要作用，各种因素导致的细胞或细胞器内钙过度集聚可引起细胞结构和功能损害，线粒体和细胞内钙异常增加程度常作为细胞损伤指征之一[14]。
多细胞有机体的发生与发育有赖于细胞增殖、分化和死亡的精密结合，即细胞周期的正常运行。本研究通过流式细胞仪检测热打击后骨骼肌细胞细胞周期分布，发现骨骼肌细胞在热打击情况下，各组G0/G1期DNA相对含量在44.13～62.98之间，与正常对照组对比，当细胞离开热打击环境后培养18h前G0/G1期DNA相对含量明显高于对照组，培养第18小时才恢复同对照组基本相同，说明热打击情况下，细胞周期出现阻滞，细胞被阻滞在G0/G1期，细胞内部活动减缓，处于“休眠”状态，不能进一步发展到S期和G2/M期，从而不能完成整个细胞的分裂过程，大约18h左右才恢复至正常状态。
参考文献
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[关键词]衰老；血管老化；细胞骨架；人参三七川芎提取物
[Keywords]senescence；vascularaging；cytoskeleton；extractsofginseng，notoginseng，andChuanxiongRhizoma
本课题组一直致力于益气活血中药延缓血管老化的研究，对增龄导致的生理性血管老化和高血压病导致的病理性血管老化进行了较系统的研究，同时，明确了益气活血中药延缓血管老化的一些关键作用机制，比如抗氧化应激、抗AngⅡ干预等，并明确了益气活血中药对血管老化的干预疗效。本研究以人主动脉平滑肌细胞骨架的微丝蛋白F-actin和G-actin为对象，观察益气活血中药人参三七川芎提取物对骨架蛋白F-actin和G-actin的干预作用，为进一步研究细胞骨架与血管老化的关系提供实验依据。
1材料
人主动脉平滑肌细胞HASMC（美国Sciencell公司，CatNo：6110，LotNo：7463）。
SMCM基础培养基（美国Sciencell公司）；胎牛血清（FBS，美国Sciencell公司）；生长因子（SMCGS，美国Sciencell公司）；双抗P/SSolution（美国Sciencell公司）；DPBS溶液（美国Sciencell公司）；细胞冻存液CFM（美国Sciencell公司）；胰酶/EDTA消化酶（美国Sciencell公司）；细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒（杰美基因医药上海科技有限公司）；细胞DNA含量检测试剂盒（细胞周期）（南京凯基生物科技发展有限公司）；CCK-8增殖试剂盒（上海东仁公司）；4%多聚甲醛（北京索莱宝公司）；TritonX-100穿透液（北京索莱宝公司）；罗丹明鬼笔环肽（美国MolecularProbes）；AlexaFlour488（美国MolecularProbes）；二甲基亚砜（DMSO，北京索莱宝公司）；噻唑蓝MTT（北京索莱宝公司）；小鼠F-actin单克隆抗体（英国Abcam公司）；辣根过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG（上海碧云天生物技术公司）；BCA蛋白浓度测定试剂盒（上海碧云天生物技术公司）；超敏ECL化学发光试剂盒（上海碧云天生物技术公司）；高效RIPA组织/细胞裂解液（北京索莱宝公司）。
人参、三七、川芎合剂冻干粉由北京因科瑞斯医药科技公司制备提供。药物均为道地药材，单味药成分检测符合药典的规定和标准，按3∶2∶4破碎成最粗粉，经乙醇回收提取，滤过，药渣弃去，醇提液回收乙醇至无醇味浓缩液，继续浓缩至稠膏，真空减压，干燥至干膏，粉碎装袋，每1g冻干粉含生药4.286g。中药冻干粉用PBS配制成贮存液，以0.22μm滤器过滤并分装，质量浓度25gL-1，-20℃保存。白藜芦醇（中国食品药品检定研究院，批号111535-200502）用DMSO溶解并配制成贮存液，质量浓度50gL-1，4℃保存。
倒置相差显微镜及成像系统（德国Leica，型号4000B）；流式细胞仪（美国Beckmam，型号CytomicsFC500）；全自动酶标仪（美国Thermo，型号MultiskanMK3）；激光共聚焦显微镜（日本Olympus，型号FV1000）；发光凝胶成像系统（SYNGENE，型号GeneGnomeXRQ）。
2方法
2.1细胞培养及传代细胞培养一般隔天换液，待培养瓶细胞密度在90%以上时进行传代，弃去原培养基，用DPBS洗2次；加入1mLDPBS与胰酶/EDTA混合液（比例为1∶4）；室温放置1.5min，待细胞变圆时，轻敲瓶底，后加入2mL完全培养基停止消化，用吸管进行吹打，收集细胞，1000rmin-1离心5min，弃上清加入培养基2～3mL吹悬，按照1∶2或1∶3传代培养。
2.5流式细胞仪分析细胞周期常规进行细胞培养，实验组药物干预48h，消化后离心并用DPBS洗涤2次，去除上清，每组加入70%冰乙醇1mL吹悬固定，4℃保存过夜。次日离心后去除固定液，DPBS洗涤1次，离心去上清，每组加入100μLRNaseA37℃水浴30min，再加入400μLPI混匀染色，4℃冰箱避光放置30min，后上机检测。
2.6激光共聚焦显微镜观察细胞F-actin和G-actin结构的改变将细胞以6×103个/孔接种于黑色96孔板，贴壁后，实验组药物干预48h。吸去原培养基，用DPBS清洗细胞2次，加入4%多聚甲醛100μL/孔，室温下固定15min，再用DPBS清洗细胞5min×3遍；加入0.1%TritonX-100100μL/孔，室温下穿透5min，再用DPBS清洗5min×3遍；最后加入罗丹明鬼笔环肽2.5μL（0.5U）/孔和Alexafluor488DNaseI2μL/孔共染色，避光室温放置30min，再用DPBS清洗5min×3遍，上机观察F-actin和G-actin的形态学改变。
2.7Westernblot检测F-actin蛋白的表达细胞样品中加入100μL含蛋白酶抑制剂、PMSF的RIPA裂解液，超声波破碎仪破碎10s，4℃16000×g离心10min，按BCA蛋白浓度检测试剂盒说明书对样品蛋白总浓度进行测定，加入样品1/4体积的5×Loadingbuffer，100℃加热10min。进行电泳及转膜后，5%脱脂奶粉室温封闭1h，完成后用TBST洗膜3次，一抗稀释比例1∶250，4℃水平摇床孵育过夜。二抗用5%脱脂奶粉封闭液稀释，稀释比例1∶3000，室温孵育60min，TBST洗涤3×10min。将膜平铺在干净的保鲜膜上，滴加配置好的ECL反应液反应2min，曝光及扫描。
2.8统计学分析应用SPSS18.0软件进行统计分析，其中计量数据以±s表示，多组样本采用单因素方差分析，用Levene法检验方差齐性，若方差齐，采用LSD法进行两两比较；若方差不齐，则采用Tamhane法。以P
3结果
3.1对SA-β-gal衰老染色的影响通过对各组染色结果的观察和计数，与青年组相比，模型组细胞蓝染数比例增多，具有显著性差异；与模型组相比，中药低、中、高剂量组及白藜芦醇组细胞蓝染数比例均明显降低，均有显著性差异（图1，表1）。
3.2对细胞增殖能力的影响各组CCK-8细胞增殖能力的检测表明，与青年组相比，模型组A明显减少，具有显著性差异；与模型组相比，中药中剂量组A明显增加，具有显著性差异，中药低剂量组A增加，具有差异性，而中药高剂量组及白藜芦醇组A增加，但无统计学意义（表1）。
3.3对细胞周期的影响通过对各组流式细胞周期的检测表明，与青年组相比，模型组G0/G1期细胞明显增多，S期细胞减少，均有显著性差异；与模型组相比，中药中、高剂量组及白藜芦醇组G0/G1期细胞明显减少，S期细胞增多，具有显著性差异，中药低剂量组则无统计学意义；G2/M期细胞数目变化均无统计学意义（表2）。
A.青年组；B.模型组；C.中药低剂量组（100mgL-1）；D.中药中剂量组（200mgL-1）；E.中药高剂量组（400mgL-1）；F.白藜芦醇组（10μmolL-1）（图2，3同）。
3.4对细胞F-actin和G-actin形态学的影响激光共聚焦显微镜显示，青年组细胞排列紧密，F-actin（红染）主要在细胞表面及外周分布，线条完整连续；G-actin（绿染）主要在细胞的中央区域分布，呈致密的椭圆形，染色清晰、饱满、圆润。模型组细胞体积变大，形态不规则，F-actin边缘毛糙不规整，出现锯齿样断裂，部分呈纵向平行排列，形成大量应力纤维；G-actin向细胞周边区域伸展，部分出现边缘变模糊呈絮状，细胞中央区域染色变弱。模型组与青年组相比，F-actin/G-actin荧光强度比值增大，具有显著统计学差异。各给药组F-actin边缘较模型组清晰光滑，且较少断裂；G-actin则主要集中于细胞中间，染色略欠饱满，尚清晰圆润。与模型组相比，中药低、中剂量组及白藜芦醇组F-actin/G-actin荧光强度比值降低，具有统计学意义，中药高剂量组则无统计学意义（图2，表3）。
3.5对F-actin和HSP27蛋白表达的影响与青年组相比，模型组的F-actin蛋白表达明显增多，具有显著差异性；与模型组相比，中药中、高剂量组及白藜芦醇组F-actin蛋白表达减少，具有显著差异性；与青年组相比，模型组HSP27蛋白表达明显减少，具有显著差异性；与模型组相比，中药低、中、高剂量组及白藜芦醇组HSP27蛋白表达明显增多，具有显著差异性（图3，表3）。
4讨论
气血是构成机体的基本物质，二者关系密切，随着衰老的进行，气虚血不行，血虚气不化，气虚血少，气血运行不畅，最终导致气虚血瘀之证，从而加速了机体衰老的进程。中药人参、三七、川芎合方属于益气活血治法的范畴，在心脑血管疾病中被广泛应用，三药合剂具有延缓血管衰老、保护血管内皮细胞及调节血管活性物质等作用[13-14]。白藜芦醇具有激活SIRT1通路、抗氧化、调节自噬及保持端粒酶活性等作用，是目前比较公认的延缓衰老的对照药物。
综上所述，复制性衰老的血管平滑肌细胞可以作为衰老研究的模型；细胞骨架微丝蛋白G-actin和F-actin形态及蛋白表达在细胞衰老过程中改变明显，其可能直接参与平滑肌细胞由收缩型向合成型转化等衰老的进程；人参三七川芎提取物可以一定程度上延缓血管老化，且对于细胞G-actin和F-actin有明显干预作用，其可能间接通过此作用延缓了血管老化的进程。
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资料与方法
本组107例，男84例,女23例。年龄＜17~60岁;左侧48例,右侧59例;横形骨折39例,粉碎性68例;直接暴力72例，间接暴力25例；均为闭合性骨折。
复位方法：患肢取伸直位，或微屈呈15°～30°中立位，术者站于患侧，一手拇指及示中指捏挤骨折远端向上推，并固定之；另一拇指及示中指捏挤近端上缘向外侧角向下推挤，使骨折断端接近。经上述手法，骨折远近端对位良好，即可暂时固定，然后采用摸法检查，若残余的前后移位，手指触摸不平时，以一手拇食指固定下陷的一端，另手拇指挤压向前突出的另一端，使之对齐、平整。最后将骨折远端挤紧，用制备好的抱膝圈固定，如骨折对位较差可隔1～2日再推挤1次，用抱膝圈固定。
固定方法：①夹板的制备：取五层椴木胶合板1块，长度自患肢大腿中上1/3至踝上2cm，宽度基本与患肢相应横径等宽，用脱脂棉及绷带塑制吻合肢体生理弧度的夹板，用绷带塑制大小适度的抱膝圈备用。②骨折复位满意后，先放置超膝后侧夹板，然后将抱膝圈套于髌骨周围，固定带分别扎在超膝后侧夹板上。然后用三列绷带将患肢与后侧夹板缠绕固定，固定后要注意观察患肢足背动脉搏动情况，以防固定过紧。抬高患肢，做患肢股四头肌收缩锻炼及患踝屈伸运动，以加速患肢血液循环，促进消肿。3～5天调整固定1次，随着肿胀的消退，逐渐缩小抱膝圈，使抱膝圈能起到良好的固定效果。
药物治疗：遵循骨折三期辨证论治的原则,早期活血祛瘀、消肿止痛,内服三七活血胶囊消肿止痛;中期和营生新、接骨续损,内服接骨丹；后期培补肝肾、强壮筋骨,内服壮筋续骨丹，解除外固定后,用我院下肢洗药煎汁熏洗患肢。
结果
本组106例均获得6个月以上随访,49例完全无痛、股四头肌肌力5级、膝关节主动伸直正常，屈曲受限在20°以内、无晚期创伤性关节炎症状出现；48例偶有疼痛但不影响日常生活及工作，股四头肌肌力5级，屈曲受限在20°以内，无晚期创伤性关节炎症状出现。10例膝关节疼痛，屈曲受限在30°以内，轻度晚期创伤性关节炎症状出现。
（一）全年蔬菜价格高位运行，走势与2009年趋同
2010年，全区蔬菜价格（15个蔬菜监测品种平均价格）普遍高于2009年，价格走势与2009年基本趋同，上半年全区蔬菜平均价格达到2.77元/500克，高于全年平均价格。其中，一季度价格偏高，进入二季度以来，价格开始有所回落，7月份价格达到谷底，之后开始回升，三季度保持小幅上扬趋势；进入四季度以来，蔬菜价格上涨幅度较大，价格明显走高，涨幅明显高于去年同期。从全年价格走势来看，与去年价格变动趋势基本趋同，但价格波动较大。
（二）蔬菜价格同比增长明显，增幅波动剧烈
2010年以来，蔬菜价格涨幅较大，截至11月上旬，较上年平均涨幅超过22%，而进入四季度以来，涨幅一路走高，11月上旬达到41.22%，价格远高于上年同期。从全年涨幅走势来看，一季度保持高位，二季度增幅有所减缓，三季度以来增速波动较大。
（三）“大众菜”价格走势平缓，“细菜”价格波动剧烈
从各月蔬菜价格情况来看，土豆、萝卜、白菜等大众菜价格走势较为平缓，而黄瓜、西红柿、豆角、青椒、茄子等“细菜”波动剧烈。黄瓜最高价由年初3.91元/500克到最低7月1.14元/500克，11月上旬达2.5元/500克，并开始逐步走高。青椒最高与最低价相差2.86元/500克，豆角最高与最低价相差3.77元/500克；而土豆、萝卜、白菜等大众菜价格最高相差不超过1.25元/500克，且全年价格基本在固定区间平缓波动(详见图3-5)。
（四）各地蔬菜涨价明显，价格过快增长
从自治区价格监测中心监测地区显示数据来看，11月上旬，除乌海市蔬菜价格低于上年同期外，其它监测地区均高于去年同期，其中，牙克石市涨幅达到71.17%，包头市、呼伦贝尔市、赤峰市、科尔沁区、集宁区、东胜区、临河区涨幅超过50%，其它涨幅均超过24%，价格显著增高。满洲里市蔬菜平均价格高达3.10元/500克，蔬菜价格最低的赤峰市也达到1.82元/500克。
二、蔬菜价格走势原因分析
（一）受季节性因素影响，蔬菜价格全年波动较大
受2009年雨雪、冰冻灾害影响，全国蔬菜生产受损严重，产量大幅减少，加之北方地区连降大雪，运输受阻，部分地区蔬菜供应紧张。同时，2009年12月下旬国内成品油价格连续上调，使得购进蔬菜的运输成本增加。随着春节临近，蔬菜市场需求量增加，一季度，我区蔬菜价格涨幅明显，呈高位运行；进入二季度，由于气温回升，我区地产蔬菜尤其应季蔬菜大量上市，蔬菜市场供应量大幅增加，蔬菜价格降幅明显，但土豆、胡萝卜、萝卜由于不是大量上市的季节，市场供应依然较为紧张，价格呈现上涨的走势；三季度，随着本地菜供应量进一步加大，蔬菜价格基本达到全年最低，呈小幅波动；10月以来，蔬菜价格明显上扬，在15个蔬菜监测品种中，除白菜、土豆、萝卜3个当地产蔬菜品种涨幅趋缓外，其它蔬菜价格上涨较快。随着天气转冷，输入型蔬菜比例增大，进入冬季，运输用柴油由0号变为－10号、－20号柴油，运输成本增加。当前全国油气短缺进一步加剧蔬菜运输成本，蔬菜价格仍会继续走高。
（二）冬季输入菜居多，蔬菜价格受产地影响较大
由于本地果绿蔬菜通过温室培育成本价远高于外地菜，而5、6月份收储菜冬季销售则需放到恒温菜室，蔬菜损耗率高，贮存成本大。因此，我区冬季蔬菜供应大多依赖外地调运，仅有部分白菜、大圆菜等冬储菜能本地供给，外运蔬菜主要来自山东寿光、淄博、河北唐山，云南昆明、广东、四川、海南等地区。近年来，宁夏、甘肃等地冬季叶绿菜供应量逐步增大。以呼和浩特市为例，进入冬季以来，外地菜供应量占总供应量高达80%-90%。本地蔬菜供给少，对整个市场的影响微乎其微，使得冬季蔬菜价格、供给量主要受制于蔬菜产地。2010年以来，我国气候表现反常，持续不断的干旱、雨雪冰冻、高温暴雨等恶劣天气，严重影响到各季蔬菜的生长，在不少地区鲜菜产量大幅萎缩，使得菜价阶段性、季节性价格走高。
（三）农资价格上涨，是蔬菜价格持续走高的趋势性原因
随着工业化、城镇化进程加速，农产品生产三大“基础成本”――生产资料、劳动力和土地价格刚性上涨渐成常态，农产品进入趋势性的上涨通道。国家统计局数据显示，2010年7月以来，我国价格总水平逐月攀升，以农副产品为主的生活必需品价格上涨较快，10月份CPI达到4.4%，创下25个月来新高，而在新涨价因素中，食品类价格上涨10.1％，为CPI涨幅“贡献”了74％。随着城市地价快速上涨，拉动了城郊地价，并进一步传导至农业地价。此外，一些农业龙头加工企业和种植大户大规模租地经营，也在一定程度上提高了农村地价，从而抬高农产品生产成本，推升农产品价格。同时，随着大量青壮年劳动力流入城镇，“用工荒”现象也在一些地方的农业领域出现，导致农村劳动力价格迅速上升，农产品尤其是蔬菜等劳动密集型产品价格必然会更加高昂。
（四）“城市化”进程加快使得城郊菜地大量被占，直接导致蔬菜价格上涨
三、对稳定我区蔬菜价格的几点建议
（一）加大蔬菜生产的扶持力度，保证蔬菜供给
（二）加快蔬菜等鲜活农产品“绿色通道”建设，降低蔬菜运输成本
（三）加大市场设施建设力度，促进蔬菜商品的流通顺畅
（四）加强市场监管，维护正常市场价格秩序
关键词：事故车现场查勘典型案例酒驾调包
ThesubstitutioncaseanalysisofthedrunkdrivinginaccidentsitesurveySichuanVocationalandTechnicalCollegeofCommunications
FengBo
Abstract：Thesitesurveyisanimportantmeansofevidencecollection，itistheimportantbasisofinsuranceclaimsandcaselitigation.Thesubstitutioncaseofthedrunkdrivingisakindofcommoncasesintheprocessofsitesurvey.Inthispaper，itanalysesarealcasetoillustratesthegeneralrecognitionmethodforsuchcases.
Keywords：accidentcar，sitesurvey，typicalcase，substitutionindrunkdriving
引言
现场查勘是指运用科学的方法和现代技术手段，对事故现场进行实地勘察和检验，通过分析存留的物证和询问认证等渠道获得事故产生的原因，并采用拍照、绘图等方式将事故结果方便而准确记录下来的工作过程。它是保险赔付、案件诉讼的重要依据。
酒驾调包是在现场查勘中常常会遇到一类案件。虽然《道路交通安全法》中对酒后驾车行为有明确的处罚规定，同时在保险公司合同条款中，也规定酒后驾驶属于免赔范围，但部分驾驶员仍难改酒后驾驶的习惯。在车辆出险后，由于驾驶员担心受到处罚并且被保险公司拒赔，于是找来他人顶包。在现场查勘过程中，如何对这类案件进行准确识别以避免保险公司损失，是查勘员必备的能力。下面就通过对一个真实酒驾顶包案件的分析来说明针对这类案件的识别方法。
一、出险情况
2012年9月11日凌晨4时左右，罗某称其驾驶一辆车牌号为粤A××的汽车由梅林关往清湖方向的××大道行驶，为避让车辆右打方向盘不慎撞上路基，后报保险公司。
二、现场情况
查勘员到达现场时，现场有两辆黑色轿车停在不远处，五六个人围在一起。这些人见查勘员到来，立即驾驶车辆离开。标的车停靠在距路基前方20m的公路边，一路上留下标的车轮轧过的痕迹，标的车前杠断裂，内部件于表，方向机断开，机油撒了一地，车内驾驶员方向盘处安全气囊爆裂。报案人罗某称自己是为了避让旁边准备超车的车辆，才猛打方向盘，撞上路基的。查勘员到达时除了罗某在现场外，还有车主黄某在现场。黄某一身酒气，并称自己也是刚到现场。
三、疑点分析
2.在询问过程中，报案人罗某称车是从车主黄某处借来的，但何时何地借车，驾车从哪里到哪里等细节都说不上来。而一身酒气的车主黄某却主动上来向查勘员讲解事发经过。
3.整个询问过程中，罗某神情紧张，常用眼角余光看黄某。
综上疑点分析，此案很有可能是车主黄某酒后驾车，出险后找来罗某顶包。
四、处理方法
为了印证疑点，查勘员分别让罗某与黄某分别到标的车试坐一下。黄某一上车就手握方向盘，脚踩踏板，动作自然。而罗某上车后呆滞地坐于座位上，连手都不知道该放哪里好。
图1车主黄某坐在驾驶员座位上图2报案人罗某坐在驾驶员座位上
鉴于以上情况，查勘员进一步怀疑驾驶员是黄某而非罗某。
查勘员随即告知当事人，由于案子较大，必须报交警，然后现场做了笔录。交警到达现场后，查勘员对交警说明了事故情况，并告知客户，由于事故较大，且有不明朗的地方，现场无法开单，需要转保险公司调查。随后标的车被拖到了交警中队。
五、处理结果
六、案例总结
总结以上案例，可以看出对于识别这类酒驾调包案件的几个要点。
1.查勘员到达现场后要仔细观察现场情况，包括道路情况、标的车情况、报案人、车主及周围环境情况等，看有无不合常规情理现象。此外，若有表1中所列现象，则应引起注意。
3.询问时注意观察被询问人的语速、表情、神态等。若被询问人说话支支吾吾、神情紧张、东张西望等，可初步判断其说谎。
4.对疑点进行印证时，可要求报案人及嫌疑人都坐到驾驶员座位上，以观察标的车座位与人体的吻合情况。
[1]《车险理赔查勘与定损》，王永盛，机械工业出版社，2008.1
[2]《汽车保险事故查勘》，骆孟波，中国铁道出版社，2011.8
[3]《事故车查勘与定损》，张红英，机械工业出版社，2010.5
[4]《汽车定损与理赔》，宋孟辉，人民邮电出版社，2005.4
[5]《汽车保险实务》，但淑英，清华大学出版社，2003.9
近年来预应力混凝土应用范围逐渐推广到更多的结构领域，如大跨超长、超厚及超静定框架结构，其混凝土强度等级必须提高至c50。在采用泵送条件下，其收缩与水化热大大增加，约束应力裂缝很难避免，张拉前开裂，张拉后又不闭合，裂缝控制的难度更加困难。预应力结构裂缝允许宽度是严格的，预应力筋腐蚀属“应力腐蚀”并有可能脆性断裂，预兆性较小，裂缝扩展速度快。裂缝深度h与结构厚度h的关系如下：h≤0.1h表面裂缝;0.1h
应当尽量避免贯穿性及纵深裂缝，如出现该种裂缝应采取化学灌浆处理来保证强度，即贯缝抗拉强度必须超过混凝土抗拉强度。
裂缝的处理
1.表面处理法：包括表面涂抹和表面贴补法
表面涂抹适用范围是浆材难以灌入的细而浅的裂缝，深度未达到钢筋表面的发丝裂缝，不漏水的缝，不伸缩的裂缝以及不再活动的裂缝。表面贴补(土工膜或其它防水片)法适用于大面积漏水(蜂窝麻面等或不易确定具体漏水位置、变形缝)的防渗堵漏
填充法用修补材料直接填充裂缝，一般用来修补较宽的裂缝()0.3mm)，作业简单，费用低。宽度小于0.3mm，深度较浅的裂缝、或是裂缝中有充填物，用灌浆法很难达到效果的裂缝、以及小规模裂缝的简易处理可采取开v型槽，然后作填充处理。2.
灌浆法
此法应用范围广，从细微裂缝到大裂缝均可适用，处理效果好。
2.结构补强法
【关键词】加油站；火灾爆炸；分析与预防
加油站是危险化学品经营企业，所经营的油品汽柴油都是易燃易爆液体。因此分析加油站火灾爆炸的原因对其采取有针对性的预防措施，是加油站安全管理的关键。下面我们通过对加油站发生的火灾爆炸事故案例分类进行分析，并提出相应的预防措施和建议。
一、卸油引起的火灾爆炸事故
（1）沙特阿拉伯首都利雅得闹市区巴塔的一家加油站着
01月07日，事故造成2人受伤，1人死亡。该加油站的地理位置是宏泰客运公司院内，西接一集贸市场，东临车站，地下埋藏储油罐4个，装有18吨汽、柴油。事故的主要责任是由于司机彭正秋严重违规操作，没有采用密封式输油法进行输油，而是将输油管直接插入储油罐所致。员工吴本军在关闭阀门的时候，由于穿的衣服出现静电，导致燃爆发生。（4）2011年1月12日
16时45分许，河北省廊坊市和平路一中石化加油站发生起火爆炸事故。廊坊市官方称，事故未造成人员伤亡，起火原因为油罐车卸油后，静电火花引发起火爆炸。以上4起事故除一起是由于汽油从量油孔外溢，流入下水道，油蒸汽与空气形成爆炸性混合气体，遇火源引起的爆燃，其余2起都是静电引起的火灾爆炸事故。汽油的闪点是-50℃，与空气的比重为0.67～0.71，爆炸极限约为1.3～6%，它有一个很重要的物理特性就是非常容易气化，挥发性非常强，有时我们用肉眼也能看到汽油液面有一层蒸腾着的雾气，1升汽油能挥发成100～400升蒸气，扩散到很大的空间。有时火源离开汽油似乎很远，但与汽油蒸气接触仍会引起燃烧，如果汽油蒸汽的浓度达到爆炸极限，就会引起爆炸。卸油时充装过快，无防静电设施或防静电设施未起作用和未穿戴防静电劳动保护护具等，会引起大量的静电电荷积累（当带电体因电荷积累达到一定的静电电位时一般大于
二、加油区的火灾爆炸事故
三、检修、清罐时引起的火灾爆炸事故
关键词：公路路基；软土；设计
Abstract:Withthedevelopmentofmodernizationtospeedupthepace,theincreasinglyhighdemandforroadtransport,asthemainpartoftheprojectofthehighwayroadbed,itsqualityisgoodorbad,directlyaffecttheservicelifeoftheroad.Sothedesignofhighwaysubgradeisfacingnewchallenges.Thesoftsoilreinforcementofthetwoaspectsofthecommonsubgradedesignandslopeofsubgradeprotectionofframeworkplant.
Keywords:HighwaySubgradeinsoftsoil;design;
中图分类号：TU2
一、概述
近年来，公路建设得到了快速发展，尤其在沿海地区。在沿江、沿湖、沿海等处广泛分布着软土，因此，在这些区域进行公路路基设计，软土地基的出现是不可避免的。为了使路基具有一定的稳定性和承载能力，确保道路发挥正常的功能，一定要对其进行处理。目前软土地基处理技术的发展迅速，出现多种多样的地基处理方法，完善了处理地基的理论和技术。
边坡防护又称坡面防护是保证路基边坡表面免受降水、日照、气温、风力等自然力的破坏，从而提高边坡的稳固性，还可美化路容，增加行车的舒适感。坡面防护工程，一般不考虑承受坡体的侧压力，故应设置在稳定的边坡上。路基边坡应根据当地气候环境、工程地质和材料及坡面等情况，选用合适的防护类型。常用的坡面防护类型有植物防护、灰浆防护和砌体防护等。随着公路等级和高等级公路服务标准的提高，公路坡面防护日渐引起公路部门的重视。由于公路线形标准高，路基高填深挖现象普遍，道路边坡安全显得至关重要。
二、软土地基路段的路基加固设计
1.固化剂法加固设计
在进行软土路基施工设计时，可以通过固化剂对原填料进行固化处理，当然它的前提是路基原填料在小的范围内受到了制约并且固化剂也有着品种和数量的约束，通过采取这种措施来避免软土高填方路段路基的出现沉陷。作为建筑材料中的一种特殊存在，它的物理与化学性质实现了不同的固化方法、特点和类别。使用的固化剂主要为固体和液体两类物理形态，而从化学特点上来看分别为主固化剂和助固化剂两类，液体主固化剂主要成分为水玻璃，而液体助固化剂则主要为碳酸镁和碳酸钙等无机盐。物理形态下的固化剂在一定程度上有所不同，它的固体主固化剂和助固化剂分别为石灰、石膏、水泥和聚丙烯酰氨和聚丙烯酸等高聚物。助固化剂是将液浆与土混合，实现深层次的土固结，主固化剂就不同了，它实现的是表面浅层的固化处理，它的措施是将固化剂与土混压。不过固化剂的多种多样需要按照实际情况来选择。
2.粉喷桩法加固设计
3.注浆加固法加固设计
4.加筋法加固设计
加筋法是将抗拉能力很强的土工合成材料埋置于土层中,利用土颗粒位移与拉筋产生摩擦力,使土与加筋材料形成整体,以减少整体变形和增强整体稳定。因为土工织物受拉作用,调整了基底应力分布,地基侧向位移和沉降却相应减少,所以地基稳定性就大大提高。
5.换填法加固设计
三、路基边坡中的骨架植物防护设计
1.浆砌片石边坡骨架植物防护设计
风化岩石和较软土质的边坡在一定的程度下会遭到雨水破坏，而边坡骨架植物对这种破坏有着制衡作用，在此同时，它能够实现土层风化的支撑与土质的保护，因此，实现浆砌片石边坡骨架植物防护在一定的程度上是必须。这种保护模式将形成拱形骨架、方格菱形骨架和人字形骨架等。通过分化管理的模式来实现支撑，也就是说一小块突破实现部分骨架支撑。事实上之中分割而形成的植物与骨架造型美而独特，具有良好的欣赏价值。骨架支撑在一定的范围里可以对坡面上渐变和相互牵引进行消除。工程对骨架的宽度和间距的设计在一定程度上要按照实际情况来确定。根据有关与公路工程的众多经验与资料来看，实现骨架保护还是拱形骨架较为有效，这种骨架能够在部分下表土面坍塌的情况下对风化土层进行坚固的支撑。不过它的缺点在于施工难度较大，不能够应用于加剧的风化界面，否则容易造成骨架破坏和浅层滑坡等事故。如此一来，支挡建筑物的设计就必须运用到这种情况中来。
2.多边形预制混凝土空心块边坡植物防护设计
多边形预制混泥土空心块是又一种边坡植物的防护措施，它能够实现全风化路堑岩石、强风化岩石和较缓等边坡的防护。它的样式不是局限于一两种，与其它的样式相比，六边形空心块较为常见。与拱形骨架相似，它也是通过小的骨架来实现边坡的支撑，但同样的方式，它的骨架密度就大多了，每一个六边形之间相互联系镶嵌，实现它更为有效的稳定与抗侵蚀能力。并且这种多边形预制混泥土空心块具有施工便捷、造型美观和保护效果明显等一系列的优势，它成了路堑坡面保护设计中的香饽饽。
3.锚杆混凝土框架边坡植草防护设计
四、结束语
参考文献：
[1]刘强.公路路基设计中常见问题分析[J].价值工程，2010（25）．
Studyonthechangesofbonemetabolismrelatedcytokinesandbonemetabolicindexesofpatientswithhyperthyroidism
WUPing
DepartmentofEndocrinology,QianjiangCentralHospitalofChongqingCity,Chongqing409000,China
[Keywords]Hyperthyroidism;Thyroidhormone;Bonemetabolismrelatedcytokines;Bonemetabolic
1资料与方法
【关键词】压力容器；爆炸事故后果；分析；评价
作为特种设备的压力容器，它的用途十分广泛，是一种在石油化学工业、能源工业、科研和军工等国民经济的各个部门都起着重要作用的设备。压力容器由于密封、承压及介质等原因，容易发生爆炸、燃烧起火而危及人员、设备和财产的安全及污染环境的事故。对于任何一个国家来说，安全生产都是关系民生的大事，是需要常抓不懈的重大课题。目前，世界各国均将压力容器列为重要的监检产品，由国家指定的专门机构，按照国家规定的法规和标准实施监督检查和技术检验，但是安全生产的形势仍然十分严峻。
一、压力容器爆炸的特点及形式
爆炸按性质可分为物理爆炸和化学爆炸。发生化学爆炸时会释放出大量的化学能，爆炸影响范围较大，而物理爆炸仅释放出机械能，其影响范围较小。
1）物理爆炸的特点。在爆炸过程中，造成爆炸发生的介质的状态参数发生变化，而化学性质不变化。例如锅炉、压力容器和各种气体或液化气体钢瓶的超压爆炸。
2）化学爆炸的特点。爆炸发生过程中介质的化学性质发生了变化，形成爆炸的能源来自物质迅速发生化学变化时所释放的能量。它主要有以下几种类型：
蒸气云团的可燃混合气体遇火源突然燃烧，是在无限空间中的气体爆炸；受限空间内可燃混合气体的爆炸；化学反应失控或工艺异常造成的压力容器爆炸；不稳定的固体或液体爆炸。
二、压力容器爆炸事故的后果分析和评价
1）爆炸冲击波的破坏作用。爆炸冲击波是一种介质状态（压力、密度、温度等）突跃变化的强扰动传播，最常见的形式是空气冲击波，其传播速度大于声速。多数情况下，冲击波的破坏伤害作用是由超压引起的。超出周围压力的最大压力称为峰值超压p，一般情况下超压意味着侧向超压，即压力是在压力传感器与冲击波相垂直的条件下测量得到的。峰值超压p可以达到数个甚至数十个大气压。冲击波超压对建筑物的破坏作用和对人员的伤害作用如表1和表2所示。
2）爆炸冲击波的超压计算。在相同的爆炸条件下，距离爆炸中心越近，波阵面上的超压也就越大。实验表明，不同数量的同类炸药发生爆炸时，如果距离爆炸中心的距离R之比炸药量q次根之比相等，则所产生的冲击波超压相同，用公式表示即为：
上面的公式中：a=（q/q0）1/3，称为炸药爆炸实验的模拟比。同样，该式也可以写成：
P（R）=P0（R/a）
根据该公式，就可以从某些已知药量的实验中所测到的超压来确定任意药量爆炸时，在各种相应距离下的超压。
3）蒸气云爆炸的冲击波伤害一破坏半径。爆炸性气体以液态储存，如果瞬态泄漏后遇到延迟点火或气态储存时泄漏到空气中遇到火源，则可能发生蒸气云爆炸。导致蒸气云形成的力来自容器内含有的能量或可燃物含有的内能，或两者兼而有之。“能”主要形式是压缩能、化学能或热能。一般说来，只有压缩能和热能才能单独导致形成蒸气云。根据荷兰应用科研院（TNO（1979））建议，可按下式预测蒸气云爆炸的冲击波损害半径：R=Cs（NE）1/3，式中：R表示损害半径，m；E表示爆炸能量kJ，可取E=VHc；V表示参与反应的可燃气体的体积，m3；Hc表示可燃气体的高燃烧热值；N表示效率因子，其值与燃料浓度持续展开所造成损耗的比例和燃料燃烧所得机械能的数量有关，一般取N=10%；Cs表示经验常数，取决于损害等级，其取值情况如表3所示。
三、避免压力容器爆炸事故的具体措施
我国《锅炉压力容器安全监察暂行条例》把压力容器定义为“压力为一个表压以上的各种压力容器”，同时明确规定，设计、制造、安装、使用、检验、维修、改造等部门必须遵照执行。一旦发生爆炸事故，会导致压力容器碎片、爆炸冲击波、有毒介质、可燃介质的燃烧及二次空间爆炸等危害，对生产、经济及人员带来危险。
1）了解爆炸事故的原因。主要由以下情况造成的：容器结构不合理、设计计算有误、粗制滥造、错用材料、强度不足等，尤其是焊缝质量低劣，没有执行严格的质量管理制度，安装不符合技术要求安装附件规格不对、质量不好，以及在运行中超压、超负荷、超温，没有执行定期检验制度等，使压力容器发生失效导致事故发生。
2）预防爆炸事故的措施。在设计上，应采用合理的结构；制造，修理、安装、改造时，加强焊接管理，提高焊接质量并按规范要求进行热处理和探伤；加强材料管理，避免采用有缺陷的材料或用错钢材、焊接材料；加强使用管理，避免操作失误，超温、超压、超负荷运行、阜阳锅炉失检、失修、安全装置失灵等；采用科学合理的设计方案，引进先进的管理方法、技术和设备，加强对压力容器的检查和监控，教育职工严格执行操作规程和各项规章制度，这样才能保证压力容器的安全运行。
本文主要研究了压力容器在一般情况下的爆炸事故，介绍了针对爆炸事故的后果分析及评价方法，有利于管理者采取有效的预防和控制措施，把危险性降到最低，避免或减少爆炸事故给人民带来的伤害，对工业生产和防护有一定的指导作用。
[1]郭吉红.压力容器爆炸事故分析和后果预测[J].工业安全与环保.2005，31（9）：52-53
[2]彭蔚华，熊大彬.压力容器安全工程学[M].北京：北京航空工业出版社，1993