实验：探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用
一、实验目的
1.初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。
二、实验原理
淀粉和蔗糖都是非还原糖，它们在酶的催化作用下都能水解成还原糖，还原糖能够与
斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的`氧化亚铜沉淀。
用淀粉酶分别催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林试剂鉴定溶液中有无还原糖，就可
以看出淀粉酶是否能催化这两种化学反应。
三、材料用具
滴管、试管、火柴、试管架、温度计、三脚架、石棉网、酒精灯、烧杯、质量分数为2%的
新鲜淀粉酶溶液、质量分数为3%的可溶性淀粉溶液、质量分数为3%的蔗糖溶液、斐林试剂
四、实验过程
五、讨论
1．制备的可溶性淀粉溶液,必须完全冷却后才能使用。为什么？
２．两支试管保温时,为什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)
3．如果2号试管也产生了砖红色沉淀,可能是由哪些原因造成的？
初步掌握鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
1、还原糖的鉴定原理生物组织中普遍存在的还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。它们的分子内都含有还原性基团（游离醛基或游离酮基），因此叫做还原糖。蔗糖的分子内没有游离的半缩醛羟基，因此叫做非还原性糖，不具有还原性。本实验中，用斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能鉴定非还原性糖。
斐林试剂由质量浓度为0.1g／mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2与加入的葡萄糖在加热的条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身则氧化成葡萄糖酸。其反应式如下：CH2OH—(CHOH)4—CHO＋2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH＋Cu2O↓＋2H2O
用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色棕色砖红色(沉淀)。
2、蛋白质的鉴定原理鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂。双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g／mL的'氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g／mL(B)的硫酸铜溶液。在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。
3、脂肪的鉴定原理脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色，被苏丹Ⅳ染成红色。
霉菌的培养与形态学观察：实验一真菌培养基的配制与灭菌
实验目的：
（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。
（2）掌握高压灭菌方法及原理
实验原理：
（1）培养基的制备原理：
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
从营养角度分析：
营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；适宜的酸碱度(pH值)和一定缓冲能力；一定的氧化还原电位；合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。
（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌
在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温
度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
实验材料与方法
配制培养基所需器材
实验设备：高压蒸汽灭菌器。
实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、
称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。
培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项
高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。
倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。
a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。
b.瓶口要过火焰。
c.左手掀开平皿小口。
d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。
e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。
f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。
分析与讨论
（1）如何证明培养基灭菌是否彻底
经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。
（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不可少的基本知识由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。
实验二霉菌的接种与培养
实验目的与要求：掌握霉菌与酵母菌的接种与培养方法。
接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，
选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。
无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，
接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的'最适生长温度为37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数适宜在偏碱性环境中生长（PH7.5～8.5）。
（1）实验材料：实验设备：温箱。
实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。
（2）实验方法：平板接种：毛霉→PDA平板（点植法）
啤酒酵母→PDA平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→PDA平板（连续划线法）
小室载玻片培养法：
1、取灭菌后小室平皿。
2、取无菌PDA琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.5～1.0cm2的琼脂块，并将其移至培养小室中的载玻片上，制作过程注意无菌。
3、用接种环取少量霉菌的孢子接种于培养基四周，用无菌镊子
将盖玻片覆盖在琼脂块上，并盖上皿盖，标记，置28～30℃培养3～5d
粮食产品的平板接种：
1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，
反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用
2.镊子取粮食种入PDA琼脂内，每皿可接种5-10粒。
放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无菌操作斜插入盖玻片数张。
注意事项：
1.空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）
2.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。
3.接种环使用前，直接在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。
4.接种环使用后，先在火焰周围把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰2－3次，杀灭表面微生物
1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素
2、常用霉菌培养基有哪些？
马铃薯蔗糖培养基
豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基察氏培养基
3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？
（1）连续划线法（青霉、曲霉）
青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采用连续划线接种法接种。
（2）点植法（根霉、毛霉）
根霉与毛霉生长区域比较大，应采用点植法。
（3）小室载玻片培养法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）
实验三霉菌的制片与形态观察
实验目的：学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；
了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解放线菌的基本形态特征。
实验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10μm）,常是细
实验材料：
（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培养3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉（Mucorsp.）、根霉；
（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。
实验方法：
（一）直接制片观察
于洁净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后小心地盖上盖玻
片。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜
（二）小室培养观察
将载玻片直接放低倍镜下观察，再换高倍镜观察。
观察原则：
毛霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜观察孢子囊孢子的形
状、大小。
根霉：菌丝、孢子同毛霉，注意观察有无假根。
曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢
子梗、顶囊、小梗和分生孢子。
青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形状等。实验结果：
分析与讨论：
青霉和曲霉的形态有哪些异同？
青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。
曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的表面放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。
从皮肤取材查真菌如何检查？
实验一练习使用显微镜
目的要求
1、练习使用显微镜，学会规范的操作方法。
2、能够独立操作显微镜。
3、能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图象。材料用具：
显微镜、e字玻片（写有上字的玻片）、动植物永久玻片、擦镜纸、纱布
方法和步骤
一、取镜和安放
1．右手握住镜臂，左手托住镜座。
2．把显微镜放在实验台上，略偏左（显微镜放在距实验台边缘7厘米左右处）。安装好目镜和物镜。
二、对光
3．转动转换器，使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。
4．把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开，便于以后同时画图)。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜，可以看到白亮的视野。
三、观察
5．把所要观察的玻片标本（也可以用印有“e”字的薄纸片制成）放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6．转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止（眼睛看着物镜，以免物镜碰到玻片标本）。
7．左眼向目镜内看，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物像更加清晰。
注意事项
1、注意安全，不要损伤显微镜、目镜和物镜。
2、材料对准通光孔，用压片夹将玻片压好。
3、下降镜筒时，不要注视目镜，一定要注视物镜，以免损坏玻片标本和物镜镜头。
4、取下玻片标本时要小心;
5、实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。
实验二观察人体的基本组织
目的要求：
1．观察人体基本组织的永久切片，认识人体的四种基本组织；
2．描述同一种组织中细胞的共同特点；
3．描述不同组织中细胞形态上的不同之处；
4．根据观察，概述组织的共同特点，形成组织的概念。材料器具：
显微镜；扁平上皮、立方上皮、柱状上皮等上皮组织玻片；横纹肌、骨骼肌、心肌等肌肉组织玻片；骨、软骨、血液、韧带、肌腱、脂肪等结缔组织玻片；神经组织的玻片。
方法步骤：
1．根据教师提供的玻片，逐个在显微镜低倍镜下认真观察，注意细胞的形态特征和细胞间的联系特点。
【思考】
1．上皮组织一般都分布在人体的什么位置想一想，上皮组织有什么主要的功能
2．神经组织的主要功能是“接受刺激，产生和传导兴奋”，构成神经组织的细胞结构上有什么特点与这种功能相适应
3．请试着用自己的语言，给组织下定义。
实验三用显微镜观察人血的永久涂片
实验方案
一手握镜臂，一手托镜座,将显微镜从镜箱中取出并放在实验台上，略偏左。
1、转动转换器，使低倍物镜正对通光孔。
2、转动遮光器，选择较大的光圈对准通光孔。
3、一眼注视目镜内，一眼睁开，同时把反光镜转向光源，通过目镜看到白亮视野后并报告教师。
1、把涂片放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
2、从侧面注视物镜，转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢下降接近涂片。
3、一眼注视目镜内，同时反方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升，直至看到物像，再略微转动细准焦螺旋，直至物像清晰，报告老师。
4、正确填写实验报告。
四、整理
1、取下涂片并复位。
2、用纱布擦拭显微镜外表。
3、转动转换器，让两物镜偏到两旁，并将镜筒降至最低位置。
4、将显微镜放回镜箱。
实验四观察小鱼尾鳍内血液的流动
一、目的要求：
1.观察血液在血管内的流动。
2.尝试分辨血管的种类以及血液在不同血管内的流动情况。
二、材料用具：
尾鳍色素少的小鱼、显微镜、培养皿、滴管、棉絮。
三、实验步骤：
1、检查实验材料用具
2、仔细检查实验材料用具是否齐全
3、取放、组装、调试显微镜
4、取放显微镜的步骤、方式是否正确；组装、调试显微镜的方法是否科学。
四、实验操作与观察
1、用浸湿的棉絮将小鱼头部的鳃盖和躯干部包裹起来，露出口和尾部。
2、将小鱼平放在培养皿中，使尾鳍平贴在培养皿上，并在尾鳍上放载玻片。
3、将培养皿放在载物台上，用低倍显微镜观察尾鳍血管内血液的流动情况。
4、找到管径最小的血管，注意观察血液在这种血管中的流动情况。
5、注意观察管径最小的血管是由什么血管分支而来的，它最终又汇入什么血管中。
五、清洁、整理实验用具
1将显微镜复原，放回显微镜箱。
2将培养皿、滴管等冲洗干净并清洁实验桌面。
六、注意事项
1、是否用浸湿的棉絮将小鱼头部的鳃盖和躯干部包裹起来。
2、是否露出小鱼的口和尾部。
3、小鱼的尾鳍是否平贴在培养皿上。
4、是否在小鱼的尾鳍上放载玻片。
5、是否用低倍显微镜观察尾鳍血管内血液的'流动情况。
6、是否找到管径最小的血管。
7、实验后是否将小鱼放回鱼缸
实验五鱼鳍在游泳中的作用
引课：提起鱼，大家都不陌生，鱼在水中能自由自在的游动，既能向前游动，又能上浮，下潜，还能转弯以及停留在一定的水层。那么，鱼在游泳中各种鳍起什么作用呢？今天，我们就来探究一下鱼鳍在游泳中的作用。
方法一：模型模拟法（当不能用直接实验法做实验时，可以用模拟实验代替实验法，即用模型代替实验对象进行实验，模拟实验的缺点是：其研究结果易受模型的局限，得出的结论不一定完全可靠。一般来说模型与实验对象的相似程度越高，实验的效果越好。）
方法二：剪除鱼鳍法（太残忍）
方法三：捆扎鱼鳍法注意事项：（对实验材料用具的选择是实验成败的关键，如对鱼体大小的选择，捆绑鱼体的夹板和线绳的选择等。经实践证明鱼体大小以6～10cm长为宜，捆绑鱼鳍用纱布较佳，捆绑鳍用轻且不易滑脱的材质为宜，如用轻的木片、塑料片等。要鼓励学生自行完成探究实验，培养学生动手能力。在实验探究鳍对鱼运动的作用时，应引导学生想办法只对单一因素进行观察，而限制其他因素的干扰，即分别探讨某一种鳍对鱼的作用，并作好实验记录。）下面我们就来开始我们的探究过程：
一、提出问题：鱼在游泳时，胸鳍、背鳍、尾鳍分别起什么作用
二、作出假设：鱼在游泳时，胸鳍、背鳍起平衡鱼体的作用，其中胸鳍有转换方向的作用，背鳍能防止鱼体侧翻；尾鳍产生前进的动力，决定运动的方向。
三、制定计划：
实验材料及用具：四个玻璃缸、四条大小相同的鲫鱼、轻的木片或塑料片、细绳子、纱布。
实验步骤：
1、在四只大玻璃缸上分别标上A、B、C、D，然后注水，水的高度为缸高的三分之二左右。
2、对三条鲫鱼做如下处理：
用木片和绳子缚住第一条鲫鱼的胸鳍后放入A缸用木片和绳子缚住第二条鲫鱼的背鳍后放入B缸用木片和绳子缚住第三条鲫鱼的尾鳍后放入C缸第四条鲫鱼做对照，不做任何处理直接放入D缸
3、观察四条鲫鱼的运动情况
四、实施计划
现象：
A缸中的鲫鱼能够向前运动，但左右摇摆不定，不能转向，不能掌握平衡。
B缸中的鲫鱼能够向前运动，但鱼体侧翻，不能维持鱼体的直立状态。
C缸中的鲫鱼能保持鱼体平衡，但基本上没有前进。
D缸中的鲫鱼既能平衡身体，又能自由自在向前游动。
五、分析结果，得出结论
鱼游泳时，主要靠身体躯干部和尾鳍的左右摆动击动水流产生前进的动力，其他鱼鳍起辅助作用。鱼在运动时，胸鳍、腹鳍和背鳍都有维持鱼体的平衡的作用，尾鳍可以产生前进的动力，同时还有决定鱼运动方向的作用。
六、表达与交流
臀鳍：协调其它各鳍，起平衡作用，若失去，身体轻微摇晃。
腹鳍起到稳定流经身体的水流的作用，也有平衡和稳定的作用。
实验一:练习使用显微镜
目的要求:
1.练习使用显微镜，学会规范的操作方法。
2.能够独立操作显微镜。
3.能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图象。
材料用具:显微镜，写有“上”字的玻片，动、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。
方法步骤
1.右手握住镜臂，左手托住镜座。
2．把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。安装好目镜和物镜。
3．动转换器，使低倍物镜对准通光孔。
4．把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目镜内，另一只眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。
5.把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6．转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止此时眼睛一定要看着物镜）。
7．一只眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的物象更加清晰。
8．练习将所观察的标本移到视野中央，先移动一下标本，物象朝相反的方向移动。说明了在目镜中看到的像是真实的像的倒像。
实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。如需擦拭目镜和物镜，请用擦镜纸。转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。
讨论
1.显微镜的使用步骤有哪些？
答：
1、取镜和安放
2、对光
3、观察（放片、调焦）
4、清洁与收镜
2.使用显微镜观察时，为什么在下降镜筒时眼睛要注视物镜？
答：物镜把载玻片压碎，也容易划伤物镜。
3.在显微镜下能看清写在不透明纸上的“上”字吗？
答：看不到，不透明的纸会阻挡光线从物镜进入光筒再从目镜射出，所以可能什么也看不见。
实验二:观察植物细胞
1、制作植物细胞的临时装片,学习制作临时装片的基本办法.
2、认识植物细胞等基本结构.
3、练习画细胞结构图.
实验准备：
分组实验器材：显微镜、洋葱、小刀、清水、滴管、吸水纸、载玻片、盖玻片、镊子、放大镜等。
实验过程：
一、制作洋葱表皮玻片标本
1、用洁净地纱布把载玻片擦拭干净。
2、把载玻片放在实验台上，用滴管在载玻片的中央滴一滴清水。
制作临时装片
3、用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块透明在膜——内表皮。把撕下的内表皮浸入载玻片的水滴中，用镊子把它展平。
4、用镊子夹起盖玻片，是它的一边先解除4载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上，这样才能避免盖玻片下面出现气泡而影响观察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在盖玻片的一侧。
6、用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
三、观察洋葱表皮细胞
利用显微镜观察洋葱表皮细胞，先用低倍镜下观察，再在高倍镜下观察。
四、洋葱鳞片叶表皮细胞图。
五、实验结束。
回收实验器材，整理实验桌。
实验三：观察人体口腔上皮细胞
1.制作和观察人体口腔上皮细胞的临时装片
2.认识人体口腔上皮细胞的结构
3.熟练画细胞结构图
材料用具：
显微镜、吸水纸、载玻片、盖玻片、生理盐水、碘液、镊子、纱布、漱口杯、牙签方法步骤
(一)制作人口腔上皮细胞的临时装片
1.用纱布擦净载玻片、盖玻片（很薄，应轻擦）
2.在载玻片中央滴一滴生理盐水（0.9%），说明：为什么用0.9%的生理盐水，观
察洋葱表皮装片用清水，都是为了让细胞所处的环境和它们所生活的环境相同，
不至于胀破或变形，使细胞保持原状。
3.漱净口。目的：将口腔的饭粒清除，以保证所取的'细胞纯度。
4.用牙签在口腔内壁轻划几下，将上面附有碎屑涂抹在生理盐水中，尽量涂均匀。
5.盖盖玻片。用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片的水滴，然后慢慢放
平（注意：避免产生气泡）。
6.染色。
①在盖玻片一侧滴加稀碘液，
②用吸水纸在盖玻片另一侧吸引，使染液
浸润标本的全部。
(二)用显微镜观察。
使用显微镜①安放②对光③放置玻片标本，调节焦距，用眼观察，在视野中会看到被染成桔黄色的上皮细胞.
（三）绘图：
人体口腔上皮细胞模式图
（四）整理：清洁玻片，废物放在指定位置。
归纳讨论：人的口腔上皮细胞有哪些基本结构，植物细胞和动物细胞相同和不同之处。答：人的口腔上皮细胞的基本结构有细胞膜、细胞质和细胞核；植物细胞与动物细胞相比，细胞壁、叶绿体和液泡是植物细胞特有的。
实验四：观察人体的基本组织
4．根据观察，概述组织的共同特点，形成组织的概念。
材料器具：
2．根据观察，同组间的同学互相讨论，认真填写下表。
主要分布位组织类型主要特征功能举例置
皮肤，消化皮肤，小肠腺上皮组织排列紧密形成表面保护，分泌道上皮
四肢，躯骨骼肌，平滑肌肉组织呈长条状紧密排列干，内脏器收缩，舒张肌官
支持，连接，软骨，软组结缔组织细胞之间间隙较大全身各处保护，营养织，血液
产生传导兴神经组织形状独特呈发散状神经系统神经纤维奋
实验五：观察叶片结构
1、练习徒手切片.
2、认识叶片的结构.
3、画叶片的表皮细胞和保卫细胞图.
材料用具:
新鲜叶片,显微镜,双面刀片,镊子,载玻片,盖玻片,叶片的永久切片,盛有清水的培养皿,滴管,吸水纸,碘液,纱布,毛笔,小木板.
方法步骤:
一、练习徒手切片,制作叶片横切片的临时切片
1、把新鲜的叶片平放在小木板上.
2、右手捏紧并排的两片刀片,沿着图中虚线的方向,迅速切割.
3、刀片的夹缝中春游切下的薄片.要多切几次(每且一次，刀片要咱蘸一下税）。把切下的薄片放入水中。
4、用毛笔蘸出最薄的一片，制成临时切片。
二、观察叶片的结构
1、用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。
2、在显微镜下分清业的表皮，叶肉和叶脉。
三、观察叶片的下表皮
1、用镊子撕下一小块叶片（如蚕豆叶片的下表皮，制成临时装片。
2、用显微镜进行观察，看一看叶片下表皮的细胞是什么样子的，下表皮上有没有气孔？下表皮气孔多于上表皮。
四，实验结果。
讨论：保卫细胞和它周围的细胞在结构上有什么不同？保卫细胞的这种结构特点对蒸腾作用有什么意义？
答：当水分充足时,保卫细胞膨胀张开,则气孔张开,这时,蒸腾作用很强；当水分不充足时,保卫细胞收缩关闭,则气孔关闭,这时,蒸腾作用变弱。保卫细胞能够控制气孔开关,所以也就能起到促进或减缓蒸腾作用的意义。
一、实验目的：
1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义
3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法
二、实验原理：
1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
细胞中过氧化物酶的显示
1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；
2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的'小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；
3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。
5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）
6、清水冲洗，番红复染2min。
7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100×）
细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:
1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)
2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS缓冲液洗2次
5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
7、普通光学显微镜下观察。吖啶橙染色:
2、生理盐水轻轻漂洗细胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
四、结果与分析：
1、根据随机选择的几个视野的统计，该样品的细胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela细胞凋亡过程中核染色质的形态变化（吖啶橙染色）
五、思考题：
1、细胞凋亡的调控机制
细胞凋亡是一个受基因调控、众多细胞膜受体和胞浆蛋白参与的细胞主动自杀过程，其触发因素多种多样，包括细胞内诱导因子和抑制因子对细胞凋亡的调控。
2、细胞凋亡的特征
凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体。
3、研究细胞凋亡的方法
定性的研究方法：常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察（普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜）
定量或半定量的研究方法：各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。
1.初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。
2.理解植物细胞发生渗透作用的原理。
当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。由于原生质层比细胞壁的.收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开，也就是分升了质壁分离当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。
紫色洋葱鳞片叶、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、刀片、吸水纸、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、实验过程(见书P60)
物理实验报告——化学实验报告——生物实验报告——实验报告格式——实验报告模板
1.如果将洋葱表皮细胞浸润在与细胞液浓度相同的蔗糖溶液中，这些表皮细胞会出现什么现象
2.当红细胞细胞膜两侧的溶液具有浓度差时，红细胞会不会发生质壁分离现象为什么
3.画一个细胞在正常状态下到经过0.3g/ml蔗糖溶液处理，再经过清水处理的细胞变化的一系列模式图。